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外泌体微小RNA-let-7c靶向结合AGO1调控多发性骨髓瘤血管生成题录
引用本文:田翔宇,孙淼淼,杨琛擘,陈超,王帅元,舒姣,陈奎生.外泌体微小RNA-let-7c靶向结合AGO1调控多发性骨髓瘤血管生成题录[J].中华实验外科杂志,2023(12).
作者姓名:田翔宇  孙淼淼  杨琛擘  陈超  王帅元  舒姣  陈奎生
作者单位:1. 郑州大学第一附属医院骨科;2. 郑州大学第一附属医院病理科;3. 郑州大学医学科学院;4. 郑州大学第五附属医院神经外科
基金项目:国家自然基金项目资助(82370208、82070222、81873455);;河南省自然科学基金青年项目(232300420245);
摘    要:目的探究多发性骨髓瘤外泌体中微小RNA(miR)-let-7c对血管内皮细胞生物学功能的影响及机制。方法从多发性骨髓瘤初治患者的骨髓活检标本中原代培养出骨髓瘤内皮细胞, 慢病毒感染后建立miR-let-7c过表达或抑制内皮细胞稳染株, 使用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell迁移实验及小管形成实验检测感染后内皮细胞的生物学行为改变, 并采用生物学信息技术预测miR-let-7c与argonaute1(AGO1)蛋白的靶向调控区, 双荧光素酶报告基因实验论证两者之间的靶向调控作用。构建多发性骨髓瘤移植瘤小鼠模型, 采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组移植瘤组织中miR-let-7c的表达水平, 免疫组织化学标记内皮细胞表面CD31来计算各组肿瘤微血管密度(MVD);采用蛋白印迹法检测各组移植瘤组织中缺氧诱导因子1α (HIF-1α)、AGO1及血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达;采用qRT-PCR检测各组移植瘤组织中HIF-1α、AGO1及VEGF的mRNA表达。两组均数间用独立样本t检验, 两组以上均数的比较用方差分析。结果用CCK-8试剂盒检测发现, ...

关 键 词:多发性骨髓瘤  微小RNA-let-7c  外泌体  血管生成
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