| 不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体的构建及重组蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 刘彤,李洋,朱戈,李丰.不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体的构建及重组蛋白的表达[J].中国医科大学学报,2011,40(12):1057-1059,1071. |
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| 作者姓名： | 刘彤 李洋 朱戈 李丰 |
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| 作者单位： | 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室,教育部医学细胞生物学重点实验室,沈阳110001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重大研究计划(90813038) |
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| 摘 要： | 目的 构建不同激酶活性的hPAK6原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达.方法 野生型、激酶活型和激酶死型pcDNA3.1-PAK6经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导不同型GST-hPAK6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果.结果 野生型、激酶活型和激酶死型hPAK6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量均为101 kDa,免疫印迹检测到了融合蛋白表达.结论 成功构建不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体,并分别诱导表达出GST-PAK6融合蛋白.
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| 关 键 词： | PAK6基因 激酶活型 激酶死型 原核表达 融合蛋白 |
Construction of Prokaryotic Plasmid of Various Kinase Activity Types of Human PAK6 Gene and Identification of Its Recombinant Protein |
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| LIU Tong
,
LI Yang
,
ZHU Ge
,
LI Feng.Construction of Prokaryotic Plasmid of Various Kinase Activity Types of Human PAK6 Gene and Identification of Its Recombinant Protein[J].Journal of China Medical University,2011,40(12):1057-1059,1071. |
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| Authors: | LIU Tong LI Yang ZHU Ge LI Feng |
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| Institution: | LIU Tong,LI Yang,ZHU Ge,LI Feng(The Research Center for Cell Biology,College of Bacic Medical Science,Key Laboratory of Medical Cell Biology Ministry of Public Education of China,China Medical University,Shenyang 110001,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PAK6 gene kinase active kinase dead prokaryotic expression fusion protein |
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