| 小鼠骨髓源性内皮祖细胞的培养和表面标志物鉴定 |
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| 引用本文： | 杨栋,辛世杰,李凤贺,王磊,汪颖厚,李悦,李晰,马文锋,张健. 小鼠骨髓源性内皮祖细胞的培养和表面标志物鉴定[J]. 中国医科大学学报, 2011, 40(12): 1063-1066 |
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| 作者姓名： | 杨栋 辛世杰 李凤贺 王磊 汪颖厚 李悦 李晰 马文锋 张健 |
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| 作者单位： | 中国医科大学附属第一医院血管甲状腺外科,沈阳,110001 |
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| 基金项目： | 辽宁省教育厅创新团队计划(2008T201),辽宁省教育厅优秀人才支持计划(2008RC53) |
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| 摘 要： | ![]()
目的 建立一种从小鼠骨髓中分离、培养内皮祖细胞(EPC)的方法,并对EPC多种表面标志物进行鉴定.方法 密度梯度离心法获取小鼠骨髓源性单个核细胞,应用专门培养基EGM-2培养.观察不同时期细胞增殖情况；在培养7d后行DIL-AC-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色鉴定及流式细胞检测；应用RT-PCR分析0,4,7d时CD31、CD34、CD45、CD117、CD133、FLK-1、VE-Cad等表面标志物的表达情况.结果 诱导培养的骨髓单个核细胞72 h后基本完成贴壁,8～9 d时贴壁70％～80％可进行传代,2～3周后呈典型的鹅卵石样外观.细胞培养7d后DIL-AC-LDL和FITC-UEA-1双染色阳性细胞比例为(90.16±6.77)％,流式细胞检测PE-Flk-1、APC-CD133、FITC-CD34均阳性概率为(1.73±0.27)％.RT-PCR结果显示随时间推移CD34、CD117、CD133的表达量逐渐下降,而CD31、FLK-1、VE-Cad等内皮系标志物的表达逐渐增加.结论 密度梯度离心法结合定向诱导培养可获得较多数量的EPC,以流式细胞检测技术为主,结合细胞形态学和功能学对EPC进行鉴定是一种较为理想的方法.
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| 关 键 词： | 内皮祖细胞 小鼠 骨髓 细胞培养 |
Culture and Surface Markers Identification of Endothelial Progenitor Cells from Mice Bone Morrow |
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| YANG Dong , XIN Shi-jie , LI Feng-he , WANG Lei , WANG Ying-hou , LI Yue , LI Xi , MA Wen-feng , ZHANG Jian. Culture and Surface Markers Identification of Endothelial Progenitor Cells from Mice Bone Morrow[J]. Journal of China Medical University, 2011, 40(12): 1063-1066 |
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| Authors: | YANG Dong XIN Shi-jie LI Feng-he WANG Lei WANG Ying-hou LI Yue LI Xi MA Wen-feng ZHANG Jian |
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| Affiliation: | YANG Dong,XIN Shi-jie,LI Feng-he,WANG Lei,WANG Ying-hou,LI Yue,LI Xi,MA Wen-feng,ZHANG Jian(Department of Vascular and Thyroid Surgery,The First Hospital,China Medical University,Shenyang 110001,China) |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | endothelial progenitor cells mice bone marrow cell culture |
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