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乳腺癌细胞中PNRC基因启动子区CpG岛甲基化状态的研究
引用本文:张艳,陈彬,李渝萍,陈健,陈敏,娄桂予,周度金.乳腺癌细胞中PNRC基因启动子区CpG岛甲基化状态的研究[J].第三军医大学学报,2008,30(4):299-302.
作者姓名:张艳  陈彬  李渝萍  陈健  陈敏  娄桂予  周度金
作者单位:第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038
摘    要:目的 研究乳腺癌细胞中富含脯氨酸核受体辅活化子(proline-rich nuclear receptor coactivator protein,PNRC)基因启动子CpG岛的甲基化状态及在PNRC转录调节中的作用.方法 应用PT-PCR检测PNRC基因在正常乳腺细胞与乳腺癌细胞中的表达情况,并运用"MethPrimer"软件对PNRC启动子区进行分析,预测CpG岛,通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测PNRC启动子区CpG岛的甲基化状况;PT-PCR及Northern杂交检测乳腺癌细胞经甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dc)作用后,PNRC基因mRNA的表达情况;Westernblot检测5-Aza-dc干预对PNRC蛋白表达的影响;将含PNRC启动子序列的报告质粒转染乳腺癌细胞,再经5-Aza-dc处理后,检测PNRC基因启动子的活性.结果 PNRC基因在乳腺癌细胞中的表达较正常乳腺细胞明显降低;乳腺癌细胞PNRC基因启动子区存在CpG岛甲基化;乳腺癌细胞经5-Aza-dc处理后,PNRC基因mRNA及蛋白表达水平显著增加,其PNRC基因启动子的活性也明显增强.结论 PNRC基因启动子区的高甲基化导致PNRC在乳腺癌细胞中表达降低.

关 键 词:DNA甲基化  5-氮杂-2'-脱氧胞苷
文章编号:1000-5404(2008)04-0299-04
收稿时间:2007-05-16
修稿时间:2007-09-05

On CpG island methylation status of PNRC gene in breast cancer cells
ZHANG Yan,CHEN Bin,LI Yu-ping,CHEN Jian,CHEN Min,LOU Gui-yu,ZHOU Du-jin.On CpG island methylation status of PNRC gene in breast cancer cells[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2008,30(4):299-302.
Authors:ZHANG Yan  CHEN Bin  LI Yu-ping  CHEN Jian  CHEN Min  LOU Gui-yu  ZHOU Du-jin
Abstract:
Keywords:PNRC  MSP
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