| AChR-IgG Fc段融合蛋白真核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 高洁,常婷,王键,李柱一. AChR-IgG Fc段融合蛋白真核表达载体的构建及表达[J]. 中国神经免疫学和神经病学杂志, 2010, 17(3): 188-191. DOI: 10.3969/j.issn.1006-2963.2010.02.010 |
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| 作者姓名： | 高洁 常婷 王键 李柱一 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学唐都医院神经内科,710038
2. 第四军医大学全军神经科学研究所,710038 |
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| 摘 要： | 目的构建人AChR-IgG Fc段融合蛋白真核表达载体AChR-IgG Fc/pAN1782并在CHOk1细胞中表达AChR-IgG Fc融合蛋白。方法以人烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)α1亚基全序列为模板,以PCR法扩增AChRα1亚基胞外段主要免疫区基因片段Hα1-121,将其插入真核表达载体pAN1782。将构建的新载体转染至CHOk1细胞,建立稳定表达AChR-IgG Fc融合蛋白的CHOk1细胞株,以Western blot法检测AChR-IgG Fc融合蛋白表达。结果 (1)Hα1-121经PCR法扩增后所获428 bp基因片段大小符合预计结果,测序所得核苷酸序列与人类基因库中AChRα1亚基胞外段基因片段Hα1-121序列完全一致,未出现点突变或移码突变。所构建的新载体经酶切鉴定证实片段插入正确,载体构建成功。(2)Westernblot法检测结果显示转染新载体的CHOk1细胞培养上清液中有AChR-IgG Fc融合蛋白表达。结论成功构建人AChR-IgG Fc段融合蛋白真核表达载体,且该融合蛋白可在转染新载体的CHOk1细胞中稳定表达,为下一步靶向B细胞治疗重症肌无力奠定了初步良好基础。
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| 关 键 词： | 重症肌无力 受体,胆碱能 IgG Fc段 融合蛋白 |
Construction of eukaryotic expression vector of AChR-IgG Fc fragment fusion protein and its expression in CHOk1 cells |
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| GAO Jie,CHANG Ting,WANG Jian,LI Zhu-yi. Construction of eukaryotic expression vector of AChR-IgG Fc fragment fusion protein and its expression in CHOk1 cells[J]. Chinese Journal of Neuroimmunology and Neurology, 2010, 17(3): 188-191. DOI: 10.3969/j.issn.1006-2963.2010.02.010 |
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| Authors: | GAO Jie CHANG Ting WANG Jian LI Zhu-yi |
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