中国人前列腺特异性膜抗原基因的克隆及鉴定

【目的】克隆中国人前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen，PSMA)的cDNA全长，并将其连接到原核表达载体pET-30(a)，构建PSMA的原核表达重组子。【方法】从前列腺癌患者活检组织中提取RNA，利用PSMA的cDNA中的EcoR I位点，将PSMA分成两段分别做RT-PCR，然后再将其分别连接到pET-30(a)中，从而得到完整PSMA的cDNA的原核表达重组子pET-30(a)-PSMA，并对其进行鉴定。【结果】首次成功克隆到全序列的中国人PSMA的cDNA，并构建了PSMA的原核表达重组子pET-30(a)-PSMA，为以后的PSMA表达、纯化及其抗体库的筛选奠定了基础。【结论】分段克隆基因，然后将基因分别连接到同一载体，是有效地对一些长片段基因进行克隆的方法之一。