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重组质粒pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISS)转染DC培养上清诱导HepG2株凋亡的研究
引用本文:周健,田德英,许东,张振纲,陈淼,章述军,吴会玲.重组质粒pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISS)转染DC培养上清诱导HepG2株凋亡的研究[J].中国免疫学杂志,2010,26(6).
作者姓名:周健  田德英  许东  张振纲  陈淼  章述军  吴会玲
作者单位:1. 武汉科技大学附属天佑医院感染科,武汉,430064
2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科,武汉,430030
基金项目:湖北省自然科学基金资助项目 
摘    要:目的:探讨人类乙肝核心抗原重组质粒pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISS)转染人外周血单核细胞来源树突状细胞后,细胞培养上清诱导肝癌细胞株HepG2凋亡的作用及机制。方法:构建真核表达质粒pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISSa,c),将其转染人外周血来源DC,用培养上清诱导HepG2的凋亡。用流式细胞仪检测已转染DC表面CD80和CD86的表达,检测培养上清诱导HepG2凋亡的变化。用ELISA法检测转染后DC培养上清的IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-4和IL-10的水平。结果:pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISSa)转染DC表面CD80和CD86的表达均有明显升高(P0.01)。转染后上清中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-12的表达增强(P0.01),Th2型细胞因子IL-4和IL-10的表达下降(P0.05),pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISSa)组培养上清对HepG2细胞具有促凋亡作用,随着培养时间延长,细胞凋亡率逐渐增加,HepG2细胞在诱导后24小时凋亡率达到最大,为18.4%。结论:重组质粒pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISSa)转染培养上清能明显促进肝癌细胞株HepG2的凋亡。

关 键 词:CpG基序  树突状细胞  共刺激分子  Th1/Th2型细胞因子

The study on apoptosis of liver cancer cell line HepG2 induced by culture supernatant of DCs transfection with recombinant plasmid pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISS)
ZHOU Jian,TIAN De-Ying,XU Dong,ZHANG Zhen-Gang,CHEN Miao,ZHANG Shu-Jun,WU Hui-Ling.The study on apoptosis of liver cancer cell line HepG2 induced by culture supernatant of DCs transfection with recombinant plasmid pEGFP-N1/CpG-HBcAg(ISS)[J].Chinese Journal of Immunology,2010,26(6).
Authors:ZHOU Jian  TIAN De-Ying  XU Dong  ZHANG Zhen-Gang  CHEN Miao  ZHANG Shu-Jun  WU Hui-Ling
Institution:ZHOU Jian,TIAN De-Ying,XU Dong,ZHANG Zhen-Gang,CHEN Miao,ZHANG Shu-Jun,WU Hui-Ling.Department of Infectious Disease,Tianyou Hospital,Wuhan University of Science , Technology,Wuhan 430064,China
Abstract:
Keywords:HepG2
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