续断水提液诱导HeLa细胞的凋亡

目的研究续断水提液诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制及药效成分。方法采用四甲基罗丹明乙酯(TMRE)染色检测线粒体膜电位变化;采用原位末端标记法(TUNEL)及Annexin V/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡;采用线粒体膜蛋白TOM20免疫荧光染色观测线粒体形态改变;采用二氯荧光素(DCF)流式细胞仪检测细胞内活性氧水平;采用溶解氧测定仪测定细胞耗氧量;采用蛋白印迹检测凋亡相关蛋白的表达。结果续断水提液在30 min内以质量浓度依赖方式显著降低HeLa细胞线粒体膜电位;显著升高TUNEL阳性染色、Annexin V单阳性及Annexin V、PI双阳性细胞数;使线粒体膜蛋白TOM20表达明显下降;使细胞耗氧量下降;使细胞浆细胞色素C、Endo G、Caspase-8含有量升高。续断单体成分续断皂苷B和木通皂苷D(续断皂苷VI)在25、50μmol/L均不能使HeLa细胞膜电位下降,对细胞增殖及形态没有影响。结论续断水提液能损伤线粒体,引起HeLa细胞凋亡,其成分续断皂苷B和木通皂苷D不是续断水提液该作用的药效成分。