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胚胎心肌细胞移植治疗缓慢型心律失常的实验研究
作者姓名:林国生 蔡军 江洪 杨波 蒋学俊 王腾 代治国 范国华 余奇劲
作者单位:林国生(430060,武汉大学人民医院心内科)      蔡军(430060,武汉大学人民医院心内科)      江洪(430060,武汉大学人民医院心内科)      杨波(430060,武汉大学人民医院心内科)      蒋学俊(430060,武汉大学人民医院心内科)      王腾(430060,武汉大学人民医院心内科)      代治国(430060,武汉大学人民医院心内科)      范国华(武汉大学人民医院胸心外科)      余奇劲(武汉大学人民医院麻醉科)
摘    要:目的探讨胚胎心肌细胞移植重建心脏优势起搏点治疗缓慢型心律失常的可行性.方法酶法分离引产男性胎儿心房组织(包括窦房结),获取单个心肌细胞,差速贴壁法纯化,4、6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPl)标记后制备成5×106个/ml心肌细胞悬液,开胸直视下将1ml悬液注入Yorkshire猪左室游离壁(n=2),对照组(n=2)注入等体积培养基DMEM,移植前3天开始应用环孢素A(Ⅳ,5mg/kg/d)和泼尼松龙(Ⅳ,2.5mg/kg/d)抑制免疫排斥反应.移植后2~3周应用射频消融技术打断希氏束建立完全性房室传导阻滞动物模型,分别应用心电图、Holter、免疫荧光显像、心腔内起搏标测和激动标测进行组织学和电生理学评价,RT-PCR检测各组Y染色体SRYmRNA表达情况.结果希氏束消融后,两组动物均形成完全性房室传导阻滞,细胞移植组室性心律频率为75±30bpm,对照组为室性逸搏心律,频率为(35±10)次/min或交界心律,最后发生室颤死亡.心腔内起搏标测和激动标测证实细胞移植组室性心律起源于细胞注射表达.心脏组织冰冻切片可见DAPI标记的呈蓝色荧光的移植细胞核,移植细胞与宿主心肌细胞间有连结蛋白43(connexin43)和N型钙粘素(N-Cadherin)的表达,说明移植细胞存活并与宿主心肌细胞形成电一机械联系.RT-PCR检测到细胞移植组SRY基因片段区,对照组未扩增出SRY片段,说明胚胎心肌细胞在移植区存活.结论心肌细胞移植可能取代电子起搏器治疗缓慢型心律失常.

关 键 词:胚胎  心肌细胞  移植  心律失常  心脏起搏,人工
修稿时间:2004-09-08
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