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根尖牙乳头干细胞细胞膜片构建及其成骨/成牙本质分化性能研究
引用本文:马学娟,刘雪梅,毕静,刘尧,陈旭.根尖牙乳头干细胞细胞膜片构建及其成骨/成牙本质分化性能研究[J].上海口腔医学,2018,27(2):123-128.
作者姓名:马学娟  刘雪梅  毕静  刘尧  陈旭
作者单位:1.中国医科大学口腔医学院 儿童口腔科,辽宁 沈阳 110002;
2.保定市第二医院 口腔科,河北 保定 071000;
3.辽宁省口腔疾病重点实验室,辽宁 沈阳 110002
基金项目:国家自然科学基金(81771059); 沈阳市科学技术计划项目(F16-205-1-25)
摘    要:目的:构建根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla, SCAP)细胞膜片,并对其组织学形态和成骨/成牙本质分化性能进行研究,为SCAP细胞膜片应用于年轻恒牙牙髓再生提供实验基础。方法:分离年轻恒牙第三磨牙牙乳头,进行SCAP原代培养。采用流式细胞术检测SCAP表面标志物,茜素红S染色检测其成骨/成牙本质分化。取第3代SCAP,膜片诱导液连续培养14 d,形成细胞膜片。对SCAP细胞膜片进行H-E染色,组织学观察;流式细胞术检测SCAP细胞膜片的细胞周期变化;实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞膜片中Runx2、ALP、Col-I基因表达;Western印迹法检测细胞膜片Runx2、ALP蛋白表达水平。采用SPSS17.0软件包对实验结果进行统计学分析,两样本细胞周期检测和qRT-PCR基因检测均数的比较采用t检验。结果:组织学H-E染色显示,SCAP细胞膜片由5~6层细胞组成,细胞量大,细胞之间排列紧密,且富含细胞外基质。SCAP细胞膜片细胞周期G2+S期所占比例较低,而G1期比例较高,提示SCAP细胞膜片增殖性能受到显著抑制(P<0.05)。同时,qRT-PCR和Western印迹法结果显示,与SCAP相比,SCAP细胞膜片成骨/成牙本质分化能力显著升高(P<0.05)。结论:SCAP细胞膜片富含细胞外基质,且成骨/成牙本质分化能力高于单纯SCAP,SCAP细胞膜片应用于牙髓再生更具有优势。

关 键 词:根尖牙乳头干细胞  细胞膜片  牙髓再生  
收稿时间:2017-08-24
修稿时间:2017-10-12

Construction of cell sheets of stem cells from apical papilla and characterization of their biological properties
MA Xue-juan,LIU Xue-mei,BI Jing,LIU Yao,CHEN Xu.Construction of cell sheets of stem cells from apical papilla and characterization of their biological properties[J].Shanghai Journal of Stomatology,2018,27(2):123-128.
Authors:MA Xue-juan  LIU Xue-mei  BI Jing  LIU Yao  CHEN Xu
Institution:1.Department of Pediatric Dentistry, School of Stomatology, China Medical University. Shenyang 110002, Liaoning Province;
2.Department of Stomatology, Second Hospital of Baoding. Baoding 071000, Hebei Province;
3.Liaoning Provincial Key Laboratory of Oral Disease. Shenyang 110002, Liaoning Province, China
Abstract:
Keywords:Stem cells from apical papilla  Cell sheets  Dental pulp regeneration  
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