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核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶相互作用通过ILK/AKT/mTOR通路抑制膀胱癌体内外生长
引用本文:邢 雷,庄 翔,陈俊霞. 核糖核酸酶抑制因子与整合素连接激酶相互作用通过ILK/AKT/mTOR通路抑制膀胱癌体内外生长[J]. 中国癌症杂志, 2018, 28(1): 30-37. DOI: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2018.01.004
作者姓名:邢 雷  庄 翔  陈俊霞
作者单位:1. 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科,重庆 4000162. 重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室,重庆 400016
基金项目:国家自然科学基金(81672536,81372203,81172424)。
摘    要:背景与目的:蛋白质相互作用控制着细胞信号转导、跨膜转运、DNA合成及转录调控等生命过程,在生命活动中发挥重要作用。前期运用GST蛋白沉降技术与免疫共沉淀等已证明核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)与整合素连接激酶(intergrin-linked kinase,ILK)在体内外直接结合。该研究旨在探讨RI与ILK相互作用对ILK/AKT/mTOR通路与膀胱癌体内外生长的影响。方法:采用免疫荧光观察RI与ILK在膀胱癌EJ细胞中的共定位。采用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer,FRET)验证RI与ILK的相互作用。构建过表达RI或ILK的EJ细胞系。采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞中RI、ILK及ILK/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)与流式细胞术分析细胞增殖与细胞周期。构建膀胱癌裸鼠移植瘤模型,观察过表达RI或ILK对移植瘤生长的影响。采用免疫组织化学与免疫荧光分析瘤组织中RI、ILK及ILK/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达。结果:EJ细胞中RI与ILK存在共定位的现象且RI与ILK存在相互作用。过表达RI抑制EJ细胞增殖并导致细胞周期阻滞于S期(P<0.05),阻碍膀胱癌移植瘤的生长(P<0.05),并抑制体内外ILK/AKT/mTOR通路的活化(P<0.05)。而过表达ILK促进细胞增殖与移植瘤的生长(P<0.05),促进体内外ILK/AKT/mTOR信号通路的激活(P<0.05)。结论:RI通过与ILK相互作用阻碍ILK/AKT/mTOR通路激活并抑制膀胱癌体内外的增殖生长。

关 键 词:核糖核酸酶抑制因子  整合素连接激酶  膀胱癌  增殖  

Ribonuclease inhibitor interacts with integrin-linked kinase and inhibits bladder cancer growth in vitro and in vivo through ILK/AKT/mTOR pathway
XING Lei,ZHUANG Xiang,CHEN Junxia. Ribonuclease inhibitor interacts with integrin-linked kinase and inhibits bladder cancer growth in vitro and in vivo through ILK/AKT/mTOR pathway[J]. China Oncology, 2018, 28(1): 30-37. DOI: 10.19401/j.cnki.1007-3639.2018.01.004
Authors:XING Lei  ZHUANG Xiang  CHEN Junxia
Affiliation:1. Department of Endocrine and Breast Surgery, the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China; 2. Department of Cell Biology and Genetics, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China
Abstract:
Keywords:Ribonuclease inhibitor   Integrin-linked kinase  Bladder cancer   Proliferation  
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