siRNA靶向稳定干扰HDGF基因胃癌细胞株的建立 |
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引用本文: | 欧文胜,方唯意,王建.siRNA靶向稳定干扰HDGF基因胃癌细胞株的建立[J].南华大学学报(医学版),2009,37(5):521-524. |
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作者姓名: | 欧文胜 方唯意 王建 |
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作者单位: | 欧文胜(郴州市人民医院,湖南,郴州,423000);方唯意(南方医科大学,肿瘤研究所);王建(中南大学,生殖与干细胞研究所) |
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摘 要: | 目的 构建针对肝癌衍生生长因子(HDGF)基因的siRNA表达载体,建立稳定干扰HDGF表达的胃癌细胞株. 方法 常规聚合酶链反应(PCR)检测HDGF基因在胃癌SGC-7901细胞株的表达情况.构建重组靶向HDGF shRNA慢病毒表达质粒pLentiU6/ HDGFshRNA,用脂质体转染的方法将载体导入胃癌细胞株.经杀稻瘟菌素筛选后,建立稳定表达siRNA的细胞株.荧光定量PCR检测干扰效率. 结果 在胃癌SGC-7901细胞株中,HDGF显示高表达.测序验证pLentiU6/HDGFshRNA重组质粒构建成功;在将干扰表达质粒稳定转染入胃癌细胞株后能明显抑制HDGF mRNA表达水平. 结论 成功构建了pLentiU6/HDGFshRNA慢病毒重组质粒,建立了稳定靶向干扰HDGF表达的siRNA胃癌细胞株.
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关 键 词: | HDGF基因 稳定干扰 胃癌细胞 |
Establishment of Gastric Cancer Cells With Stable Interference by siRNA Targeting HDGF |
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Abstract: | |
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Keywords: | siRNA |
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