| 纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探 |
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| 引用本文： | 李敏惠,陈瑜,蒋玉亮,李艳,余赟,毛明星,林定彪,杨亚琼,杨平. 纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探[J]. 成都医学院学报, 2016, 11(5): 532-536,564. DOI: 10.3969/j.issn.1674-2257.2016.05.003 |
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| 作者姓名： | 李敏惠 陈瑜 蒋玉亮 李艳 余赟 毛明星 林定彪 杨亚琼 杨平 |
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| 作者单位： | 成都医学院科研实验中心,成都,610083;成都医学院生物医学系,成都,610083;成都医学院基础医学院,成都,610083 |
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| 基金项目： | 四川省教育厅项目(13ZB0220)，四川省科技厅项目(2015JY0205)，四川省卫生厅项目(130302;130298)，成都医学院科研基金(CYZ11-005)，国家级大学生创新项目(201313705007 |
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| 摘 要： | 目的 建立纳豆激酶(nattokinase,NK)酶联检测体系,探讨其跨膜转运机制.方法 采用杂交瘤技术筛选抗NK的单克隆抗体,竞争抑制法鉴定单抗识别的抗原表位,Western Blot测定单抗特异性,双抗夹心ELISA法进行单抗灵敏度测定,Caco-2细胞模型探讨NK跨膜转运机制,生物信息学预测NK穿膜相关序列.结果 筛选得到稳定分泌抗体且特异性识别NK的杂交瘤细胞6株,其中3株单抗识别相近的抗原表位,其余单抗识别不同的抗原表位;6株单抗检测NK的最小灵敏度分布为0.78～20.00 ng/mL;Caco-2细胞模型显示,胞吞作用不是NK跨膜转运的主要途径;生物信息学提示,NK中含有3段穿膜相关序列.结论 基于NK单抗建立的酶联检测体系,可有效监控NK跨膜转运过程,NK可能是依据蛋白转导结构域直接介导而实现其肠道吸收转运.
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| 关 键 词： | 纳豆激酶 单克隆抗体 跨膜转运 蛋白转导结构域 |
A Study on the Detection System and Transmembrane Transport Mechanism of Nattokinase |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nattokinase Monoclonal antibodies Transmembrane transport Protein transduction domain |
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