| 骨桥蛋白在肝癌细胞中转录后调控的研究 |
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| 引用本文： | 秦宝山,张金平. 骨桥蛋白在肝癌细胞中转录后调控的研究[J]. 重庆医学, 2011, 40(35). DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2011.35.005 |
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| 作者姓名： | 秦宝山 张金平 |
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| 作者单位： | 1. 郑州人民医院消化内科,郑州,450003
2. 郑州大学第一附属医院消化内科,郑州,450052 |
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| 摘 要： | 目的 分离鉴定在肝癌细胞HepG2 和Hep3B中与骨桥蛋白(OPN)5′非翻译区(5′-UTR)结合后在转录后水平调节OPN mRNA的稳定性的mRNA结合蛋白.方法 利用亲和纯化的方法分离和纯化OPN 5′ UTR结合蛋白,质谱分析消化后的片段以鉴定蛋白;Hep3B细胞瞬时转染真核细胞翻译延长因子 1A(EF1A) siRNA抑制EF1A,HepG2细胞瞬时转染(pcDNA 3.1+EF1A)质粒过表达EF1A,Western blot检测OPN蛋白的表达,real-time PCR 检测OPN mRNA半衰期的变化.结果 质谱分析法确认此结合蛋白为EF1A.在HepG2细胞中过表达EF1A能通过加速OPN mRNA的降解而降低OPN表达;在Hep3B细胞中利用siRNA技术下调EF1A的表达能增强OPN mRNA的稳定性,进而增强OPN的表达.结论 EF1A作为一个去稳定因素作用于OPN 5′UTR,至少部分决定了Hep3B和HepG2细胞中OPN的表达.
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| 关 键 词： | 癌,肝细胞 5′非翻译区 肽链延伸,翻译 RNA稳定性 骨桥蛋白 |
A study on posttranscriptional regulation of osteopontin in hepatoma cell |
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| Qin Baoshan,Zhang Jinping. A study on posttranscriptional regulation of osteopontin in hepatoma cell[J]. Chongqing Medical Journal, 2011, 40(35). DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2011.35.005 |
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| Authors: | Qin Baoshan Zhang Jinping |
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