| nr1h4调控转基因斑马鱼模型建立及相关研究 |
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| 作者姓名： | 刘彩萍 朝宝 冯元州 孙岚 骆媛 杨景峰 董武 王永安 李月廷 赵宝全 |
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| 作者单位： | 1. 北京中医药大学第一临床医学院;2. 北京中医药大学附属中西医结合医院;3. 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室;4. 内蒙古自治区毒物监控及毒理学重点实验室内蒙古民族大学动物科技学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（82060672）； |
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| 摘 要： | 目的 建立法尼醇X受体(FXR，基因名称nr1h4)组织特异性荧光标记转基因斑马鱼模型，为胆汁酸代谢相关药物筛选及安全预警提供可视化检测动物模型。方法 在UCSC网站查找斑马鱼nr1h4基因调控序列，并利用Promoter 2.0软件对其进行优化，设计引物，利用PCR方法调取斑马鱼nr1h4调控序列，构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点，将pTol2-nr1h4-EGFP质粒与pCS-TP转座酶mRNA共同注入斑马鱼受精卵单细胞，筛选出在肝脏和肠道中特异性表达的荧光个体，通过遗传学筛选，建立Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼品系。将受精后第4天的Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼幼鱼随机分为空白对照组、溶媒对照组、甘氨酸-β-鼠胆酸组、奥贝胆酸组以及低、中、高浓度(10、20、40μg·mL-1)熊去氧胆酸组、胆宁片组、大黄酸组和芦荟大黄素组，连续给药4 d，观察各组转基因斑马鱼不同时间的荧光强度及发育情况，并对荧光强度进行分析。结果 成功建立了Tg(-1.6nr1h4-EGFP)荧光标记转基因斑马鱼品系，绿色荧光于体节期开始在斑马鱼腹...
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| 关 键 词： | 法尼醇X受体 转基因斑马鱼模型 胆宁片 芦荟大黄素 大黄酸 熊去氧胆酸 奥贝胆酸 甘氨酸-β-鼠胆酸 |
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