| pGenesil-2.1- iASPP-shRNA质粒的构建及转染 |
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| 引用本文： | 饶敏,李莉华,郭子健,梁环宇,王晓艳,过建工,戴赛民.pGenesil-2.1- iASPP-shRNA质粒的构建及转染[J].山东医药,2011,51(50):27-28. |
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| 作者姓名： | 饶敏 李莉华 郭子健 梁环宇 王晓艳 过建工 戴赛民 |
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| 作者单位： | 1. 苏州大学附属第四人民医院,江苏无锡,214062
2. 盐城城南医院 |
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| 摘 要： | 目的构建针对iASPP基因的短发卡RNA干扰（iASPP-shRNA）质粒，并转染胃癌细胞AGS（p53野生型）。方法以iASPP为靶基因设计两条带有短发卡结构的寡核苷酸序列，连接到pGenesil-2．1载体，转化感受态大肠杆菌DH5a，提取质粒转染胃癌细胞并培养形成稳定的细胞系，PCR检测转染AGS细胞中的iASPP基因。结果构建的pGenesil-2．1-iASPP—shRNA质粒测序证实iASPP基因序列完全正确，该质粒转染AGS细胞后，其iASPP基因表达受抑制。结论成功构建了pGenesil-2．1-iASPP—shRNA质粒，并可成功转染AGS细胞而抑制其iASPP基因的表达。
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| 关 键 词： | iASPP基因 RNA干扰 寡核苷酸序列 基因转染 |
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