米贝地尔增强3,3′二吲哚甲烷对肝癌细胞的抑制作用 |
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作者姓名: | 姜袁越 徐伟 顾杰 叶洋 徐新明 孙俊 陈健 陆荣柱 |
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作者单位: | (1. 江苏大学医学院,江苏 镇江212013; 2. 昆山市中医医院病理科,江苏 苏州 215300; 3.江苏大学生命科学研究院,江苏 镇江212013; 4. 江苏大学附属昆山医院普外科,江苏 苏州 215132;5.江苏大学附属昆山医院临床实验研究中心,江苏 苏州 215300) |
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摘 要: | 目的: 探讨T型钙通道阻滞剂米贝地尔对3,3′二吲哚甲烷(3,3′-diindolylmethane, DIM)抗肝癌效应的影响及其潜在的分子机制。方法: 选用肝癌SMMC-7721和HepG2细胞,分别设4组,对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养24.5 h;米贝地尔组用5 μmol/L米贝地尔处理24.5 h;DIM组用60 μmol/L DIM处理24.5 h;米贝地尔+DIM组用5 μmol/L米贝地尔预处理0.5 h,再与60 μmol/L DIM共同处理24 h;采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、裂解的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)以及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylation of p38 mitogen activated protein kinase,p-p38 MAPK)表达水平;以Fluo 3/AM为探针,观察肝癌细胞胞质游离钙(cytosolic free calcium,[Ca2+]i)水平。结果: 与对照组相比,DIM组细胞增殖活力下降,PCNA表达明显降低,凋亡水平升高,cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平明显升高(P均<0.05);部分细胞形态消失,[Ca2+]i荧光增强。与DIM组相比,米贝地尔+DIM组细胞增殖活力明显降低,PCNA表达明显下降,凋亡水平进一步升高,且cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平进一步升高(P均<0.05);多数细胞形态消失,[Ca2+]i荧光增强更明显。结论: T型钙通道阻滞剂米贝地尔可增强DIM抗肝癌作用,可能与[Ca2+]i水平增加以及p p38 MAPK表达升高有关。
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关 键 词: | T型钙通道阻滞剂 3 3&prime 二吲哚甲烷 肝癌细胞 胞质游离钙 p38丝裂原活化蛋白激酶 米贝地尔 |
收稿时间: | 2020-02-20 |
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