米贝地尔增强3，3′二吲哚甲烷对肝癌细胞的抑制作用

目的: 探讨T型钙通道阻滞剂米贝地尔对3，3′二吲哚甲烷（3，3′-diindolylmethane, DIM）抗肝癌效应的影响及其潜在的分子机制。方法： 选用肝癌SMMC-7721和HepG2细胞，分别设4组，对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养24.5 h；米贝地尔组用5 μmol/L米贝地尔处理24.5 h；DIM组用60 μmol/L DIM处理24.5 h；米贝地尔+DIM组用5 μmol/L米贝地尔预处理0.5 h，再与60 μmol/L DIM共同处理24 h；采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化；采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力；Hoechst 33342染色观察细胞凋亡水平，蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）、裂解的半胱氨酸蛋白酶3（cleaved caspase 3）以及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（phosphorylation of p38 mitogen activated protein kinase，p-p38 MAPK）表达水平；以Fluo 3/AM为探针，观察肝癌细胞胞质游离钙（cytosolic free calcium，［Ca2+］i）水平。结果： 与对照组相比，DIM组细胞增殖活力下降，PCNA表达明显降低，凋亡水平升高，cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平明显升高（P均<0.05）；部分细胞形态消失，［Ca2+］i荧光增强。与DIM组相比，米贝地尔+DIM组细胞增殖活力明显降低，PCNA表达明显下降，凋亡水平进一步升高，且cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平进一步升高（P均<0.05）；多数细胞形态消失，［Ca2+］i荧光增强更明显。结论： T型钙通道阻滞剂米贝地尔可增强DIM抗肝癌作用，可能与［Ca2+］i水平增加以及p p38 MAPK表达升高有关。