| 结核分枝杆菌毒力分泌系统Rv3871基因的分子克隆及蛋白表达研究 |
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| 引用本文： | 秦紫芳,邱云青,黄毕,高蕾,鲍朗. 结核分枝杆菌毒力分泌系统Rv3871基因的分子克隆及蛋白表达研究[J]. 中国病原生物学杂志, 2008, 3(11) |
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| 作者姓名： | 秦紫芳 邱云青 黄毕 高蕾 鲍朗 |
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| 作者单位： | 1. 四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室,四川,成都,610041
2. 北京市结核病胸部肿瘤研究所,北京,101100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的为探索参与结核分枝杆菌(MTB)毒力分泌系统相关基因的分子功能,对MTB H37Rv株编码Rv3871蛋白基因进行克隆、表达及鉴定分析。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,用PCR扩增Rv3871基因片段,并重组到原核表达载体pET32a( )中,转化E.coliBL21(DE3)菌株,用IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western blot对目的蛋白进行检测分析。结果阳性重组质粒经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切得到1 776和5 900 bp两条片段,与预期大小一致。重组质粒测序,与NCBI上Rv3871编码序列比对完全一致,且输入片段读码框与表达载体读码框相吻合。SDS-PAGE检测表达蛋白分子质量单位为84 ku;Western blot检测出特异性阳性信号。结论本研究成功构建了结核杆菌毒力分泌系统重要相关基因Rv3871的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达Rv3871蛋白,为进一步探讨该基因在MTB毒力分泌中的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 分枝杆菌 结核 毒力分泌系统 蛋白表达 |
Molecular cloning of Rv3871 gene for secretion system of the virulence in Mycobacterium tuberculosis and its expression in Escherichia coli |
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| QIN Zi-fang,QIU Yun-qing,HUANG Bi,GAO Lei,BAO Lang. Molecular cloning of Rv3871 gene for secretion system of the virulence in Mycobacterium tuberculosis and its expression in Escherichia coli[J]. Journal of Pathogen Biology, 2008, 3(11) |
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| Authors: | QIN Zi-fang QIU Yun-qing HUANG Bi GAO Lei BAO Lang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rv3871 |
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