| VEGF-C基因3′端未翻译区对荧光素酶表达的影响 |
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| 引用本文： | 王俊,郭燕,章必成,关华军,陈正堂.VEGF-C基因3′端未翻译区对荧光素酶表达的影响[J].解放军医学杂志,2007(9). |
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| 作者姓名： | 王俊 郭燕 章必成 关华军 陈正堂 |
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| 作者单位： | 第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所，第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所，广州军区武汉总医院肿瘤科，第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所，第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30371586) |
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| 摘 要： | 目的构建小鼠血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因3′端未翻译区(3′UTR)的荧光素酶表达载体,利用双荧光报告系统观察VEGF-C基因3′UTR对荧光素酶基因表达的影响。方法通过PCR分别扩增小鼠Lewis肺癌细胞VEGF-CcDNA全长3′UTR(429bp)和一段312bp的编码区序列(CR),采用基因工程方法将PCR产物克隆至pTA2克隆载体,随后再亚克隆至荧光素酶报告基因载体(pGL3-Promoter)荧光素酶编码基因下游的XbaⅠ酶切位点,使用LipofectamineTM2000真核转染小鼠Lewis肺癌细胞,化学发光法检测荧光素酶的活性,定量RT-PCR检测荧光素酶mRNA水平。结果PCR成功扩增出与预期长度相符的小鼠VEGF-CCR(312bp)和VEGF-C3′UTR(429bp)。经酶切、测序鉴定,小鼠VEGF-C基因3′UTR和CR均插入到pGL3-Promoter的XbaⅠ位点,插入序列碱基组成和插入方向均正确,获得载体pGL3-VEGF-C3′UTR和pGL3-VEGF-CCR。荧光素酶报告系统和定量RT-PCR检测显示,与pGL3-Promoter组比较,pGL3-VEGF-C3′UTR转染组荧光素酶活性和mRNA水平均显著降低,而pGL3-VEGF-CCR组与pGL3-Promoter组之间无显著性差异。结论VEGF-C基因3′UTR可以抑制荧光素酶的表达。
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子C 3′未翻译区 荧光素酶 淋巴管生成 |
Influence of 3' untranslated region of vascular endothelial growth factor-C gene on the expression of luciferase |
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| Wang Jun,Guo Yan,Zhang Bicheng,et al..Influence of 3' untranslated region of vascular endothelial growth factor-C gene on the expression of luciferase[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2007(9). |
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| Authors: | Wang Jun Guo Yan Zhang Bicheng |
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| Institution: | Wang Jun,Guo Yan,Zhang Bicheng,et al.Cancer Institute of PLA,Xinqiao Hospital,Third Military Medical University,Chongqing 400037,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | vascular endothelial growth factor C 3' untranslated regions luciferase lymphangiogenesis |
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