| 胰岛素受体酪氨酸激酶底物基因的克隆表达及其对细胞形态的影响 |
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| 引用本文： | 李婷婷,程志红,王克生,陈斐,韩泽广,张新. 胰岛素受体酪氨酸激酶底物基因的克隆表达及其对细胞形态的影响[J]. 医学分子生物学杂志, 2009, 6(3). DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.006 |
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| 作者姓名： | 李婷婷 程志红 王克生 陈斐 韩泽广 张新 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物工程学院,上海市,200237;国家人类基因组南方研究中心,上海市,201203;国家人类基因组南方研究中心,上海市,201203 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家重点基础研究发展规划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的 对胰岛素受体酪氨酸激酶底物(insulin receptor tyrosine kinase substrate,IRTKS)基因功能进行初步研究,检测IRTKS在正常组织及肿瘤细胞株中的表达情况,构建强力霉素DOX(tet-off)调控的高表达IRTKS的稳定株并研究其对细胞形态的影响.方法 克隆并构建IRTKS的原核及真核重组质粒,制备针对IRTKS的多克隆抗体,Northern 印迹检测IRTKS组织表达谱,Western印迹检测IRTKS细胞株表达,转染HT1080细胞构建DOX调控的IRTKS高表达tet-off稳定株,细胞免疫荧光实验研究IRTKS高表达对细胞形态的影响.结果 在多种组织和细胞株中都检测到IRTKS的表达,构建了受DOX调控的高表达IRTKS的稳定株,高表达IRTKS蛋白的细胞变得铺展,纤维状肌动蛋白(F-actin)出现丝状聚集,细胞伸出板状伪足(lamellipodia).结论 IRTKS是一个在多种组织和细胞株中都有表达的蛋白,构建的IRTKS稳定株可以在DOX调控下稳定高表达IRTKS蛋白,IRTKS蛋白的高表达促进HT1080细胞铺展,纤维状肌动蛋白包装及细胞伸出板状伪足.
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| 关 键 词： | 胰岛素受体酪氨酸激酶底物 组织表达谱 板状伪足 |
Cloning and Expressing of IRTKS and Its Effect on Cell Morphology |
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| LI Tingting,CHENG Zhihong,WANG Kesheng,CHEN Fei,HAN Zeguang,ZHANG Xin. Cloning and Expressing of IRTKS and Its Effect on Cell Morphology[J]. Journal of Medical Molecular Biology, 2009, 6(3). DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.006 |
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| Authors: | LI Tingting CHENG Zhihong WANG Kesheng CHEN Fei HAN Zeguang ZHANG Xin |
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