WISP-3/CNN6与Caspase-8共结合在高氧诱导肺上皮细胞凋亡中的作用及其机制

目的探讨Wnt-1诱导信号通路蛋白3/调节蛋白6(WISP-3/CNN6)与半胱氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)共结合在高氧诱导肺上皮细胞凋亡中的作用与可能机制。方法利用小干扰RNA和质粒转染实现对人肺上皮Beas-2B细胞中WISP-3/CCN6基因的沉默或过表达,分别将低表达或过表达WISP-3/CCN6的Beas-2B细胞置高氧(95%O₂和5%CO₂)或空气中处理0、24、48 h,通过蛋白免疫印迹法和流式细胞仪检测各组细胞中Caspase途径凋亡相关蛋白Caspase-8、Caspase-3及活性片段cleaved Caspase-8、cleaved Caspase-3和cleaved多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达量及Caspase-8活性,通过免疫共聚焦和免疫共沉淀检测WISP-3/CCN6与Caspase-8的蛋白相互作用。结果高氧刺激48 h,WISP-3/CCN6沉默的Beas-2B细胞中cleaved Caspase-8、cleaved Caspase-3和cleaved PARP蛋白表达量均比0 h时增加(P...