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人源性促甲状腺激素受体抗体Fab段抗体库的构建
引用本文:杜晓明,李宁,宋春青,方佩华.人源性促甲状腺激素受体抗体Fab段抗体库的构建[J].国际内分泌代谢杂志,2015,35(4).
作者姓名:杜晓明  李宁  宋春青  方佩华
作者单位:1. 300140,天津市第四中心医院内分泌科
2. 300052,天津医科大学总医院核医学科
基金项目:天津市卫生局科技重点项目
摘    要:目的 通过噬菌体表面展示技术,构建人源性促甲状腺激素受体抗体(TRAb)Fab片段抗体库.方法 从甲状腺功能亢进症患者外周血单个核细胞抽提总RNA,PCR法扩增免疫球蛋白分子轻链K、λ基因及重链Fd基因.构建轻链文库及组合文库.一个随机的组合文库在噬菌体表面表达.结果 从外周血单个核细胞中抽提得到总RNA,并反转录获得cDNA文库.PCR法扩增了大小约为680 bp的轻链K、λ基因及重链Fd基因,并构建了库容为1.32×105基因抗体库(轻链库)和库容为2.28×105 Fab抗体库(组合文库).Fab组合文库转化到大肠杆菌XL1-Blue感受态细胞,在辅助噬菌体M13K07的辅助下,扩增得到噬菌体抗体库.结论 噬菌体表面展示技术可成功构建人源性TRAb Fab片段组合文库.

关 键 词:噬菌体表面展示技术  人源性单克隆抗体  促甲状腺激素受体抗体Fab

Construction of Fab fragment library of human thyrotrophin receptor antibody
Du Xiaoming,Li Ning,Song Chunqing,Fang Peihua.Construction of Fab fragment library of human thyrotrophin receptor antibody[J].International JOurnal of Endocrinology and Metabolism,2015,35(4).
Authors:Du Xiaoming  Li Ning  Song Chunqing  Fang Peihua
Abstract:
Keywords:Phage display technology  Human monoclonal antibodies  Thyrotrophin receptor antibody Fab
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