| 自外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞的方法研究 |
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| 引用本文： | 毕冬梅,韩晓建,石佳宁,刘晔,金艾顺.自外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞的方法研究[J].国际免疫学杂志,2015,38(4). |
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| 作者姓名： | 毕冬梅 韩晓建 石佳宁 刘晔 金艾顺 |
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| 作者单位： | 150081,哈尔滨医科大学基础医学院免疫学教研室 |
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| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金重点项目，教育部留学回国人员科研启动基金 |
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| 摘 要： | 目的 建立自人外周血淋巴细胞(PBMCs)中的记忆B细胞活化和分化特异性抗体分泌细胞(如浆细胞)的体外活化方法,为抗体药物研发提供研究基础.方法 采集两名接种过乙型肝炎疫苗3年和25年健康成年志愿者(Z和L)外周血,分离PBMCs,通过白细胞介素(IL)-2、IL-4和Toll样受体诱导剂(CpG、R848)体外诱导活化记忆B细胞.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中总抗体和HBsAg特异性抗体的含量;通过酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测培养细胞中总抗体分泌细胞(ASC)数量的变化和HBsAg特异性抗体细胞数量.结果 活化第6天,对照组和两个活化组CpG DNA2006联合IL-2(C组)和R848联合IL-2(R组)]细胞培养上清总免疫球蛋白(Ig)G浓度分别为37.06ng/mL、80.87 ng/mL和85.97 ng/mL,两个活化组(C组和R组)均明显高于对照组(t=23.318,60.639,P均＜0.05).ELISPOT检测ASC数量,结果显示,C组和R组数量均多于对照组,并且R组明显多于C组.两种活化方法均能在体外诱导B细胞活化,但R组活化效果更佳,确立R组为最佳活化方法.用该方法活化两名乙型肝炎疫苗接种者PBMCs,ELISA检测活化组特异性抗体浓度,R组显著高于对照组(t=5.031,11.561,P均＜0.05).不同细胞数量诱导的分组,ELISPOT检测HBsAg特异性抗体分泌细胞数量,R组均明显多于对照组.结论 确立诱导剂R848和细胞因子IL-2联合能够有效地诱导外周血记忆B细胞体外活化和分化抗原特异性浆细胞,为今后抗体药物研发提供了研究基础.
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| 关 键 词： | 外周血单个核细胞 记忆B淋巴细胞 体外活化 抗原特异性浆细胞 |
Establishment of activation and differentiation of memory B cells into antigen-specific secreting cells from peripheral blood mononuclear cells in vitro |
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| BI Dongmei,HAN Xiaojian,SHI Jianing,LIU Ye,JIN Aishun.Establishment of activation and differentiation of memory B cells into antigen-specific secreting cells from peripheral blood mononuclear cells in vitro[J].International Journal of Immunology,2015,38(4). |
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| Authors: | BI Dongmei HAN Xiaojian SHI Jianing LIU Ye JIN Aishun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Memory B lymphocytes Antigen specific antibody secreting cells In vitro activation Peripheral blood mononuclear cells |
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