| 核苷酸切除修复基因XPB反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究 |
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| 引用本文： | Zhou LC,Jiang Y,Wu XM,Hao QL,Ren S,Zhou YK. 核苷酸切除修复基因XPB反义RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究[J]. 癌症, 2003, 22(9): 907-911 |
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| 作者姓名： | Zhou LC Jiang Y Wu XM Hao QL Ren S Zhou YK |
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| 作者单位： | 1. 深圳市出入境检验检疫局,广东,深圳,518000
2. 华中科技大学同济医学院公共卫生学院,湖北,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金,39990570, |
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| 摘 要： | 背景与目的：核苷酸切除修复机制是细胞修复损伤DNA的重要途径,肿瘤细胞的耐药常伴随DNA损伤修复基因表达增强,采取反义策略降低细胞的DNA损伤修复能力可以增加肿瘤细胞的药物敏感性。本研究拟构建能在哺乳动物细胞中表达XPB反义RNA的表达质粒pcDNA-XPB/AS(XPB：着色性干皮病B基因),并初步探讨其对肺癌细胞DNA损伤修复能力及抗肿瘤药物耐药性的影响。方法：采用RT-PCR技术扩增的XPB cDNA5′端一段69--520bp的序列被反向插入表达质粒pcDNA3．1／His。将该重组质粒瞬时转染肺癌A549细胞。单细胞凝胶电泳(SCGE)比较阿霉素诱导的转染前后细胞DNA损伤修复情况。MTT法检测转染前后细胞对阿霉素的敏感性。结果：酶切图谱分析和基因测序证实反义表达质粒构建成功。RT-PCR显示转染细胞XPB mRNA表达水平下降。以4．Oμg／ml阿霉素诱导细胞DNA损伤,SCGE显示转染细胞修复DNA损伤能力受到抑制。MTT显示未转染细胞与转染细胞对阿霉素的敏感性存在差别,但无统计学意义。结论：构建的反义表达质粒能下调转染细胞XPB mRNA表达,抑制细胞DNA损伤修复能力,为进一步研究XPB基因功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 核苷酸切除修复基因 XPB 反义RNA表达质粒 构建 功能 药物敏感性 肿瘤细胞 |
| 文章编号： | 1000-467X(2003)09-0907-05 |
| 修稿时间： | 2002-11-11 |
Construction of nucleotide excision repair gene XPB antisense RNA expression plasmid and its functions |
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| Zhou Li-Cheng,Jiang Yi,Wu Xiao-Ming,Hao Qiao-Ling,Ren Shu,Zhou Yi-Kai. Construction of nucleotide excision repair gene XPB antisense RNA expression plasmid and its functions[J]. Chinese journal of cancer, 2003, 22(9): 907-911 |
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| Authors: | Zhou Li-Cheng Jiang Yi Wu Xiao-Ming Hao Qiao-Ling Ren Shu Zhou Yi-Kai |
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| Affiliation: | Public Health College, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, Hubei, 430030, PR China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Xeroderma pig mentosum B (XPB) Nucleotide excision repair Antisense RNA Drug sensitivity |
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