| 日本血吸虫大陆株14-3-3信号转导蛋白epsilon 亚型基因的表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 唐小牛,汪学龙,沈继龙.日本血吸虫大陆株14-3-3信号转导蛋白epsilon 亚型基因的表达及鉴定[J].中国病原生物学杂志,2003,16(6):358-361. |
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| 作者姓名： | 唐小牛 汪学龙 沈继龙 |
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| 作者单位： | 1. 皖南医学院寄生虫学教研室,安徽芜湖,241001
2. 安徽医科大学病原生物学教研室,安徽合肥,230032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No .30 1 70 841 )，皖南医学院中青年科研基金资助 (No .WK2 0 0 2 0 9) |
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| 摘 要： | 目的 构建日本血吸虫大陆株 14 3 3信号转导蛋白epsilon亚型基因真核表达重组质粒pBK Sj14 3 3 ,并进一步在大肠杆菌中表达和鉴定 ,为其进一步保护性免疫的研究提供条件。 方法 根据日本血吸虫 14 3 3蛋白的核苷酸序列 ,设计合成 1对引物 ,以日本血吸虫大陆株成虫总RNA为模板 ,用RT PCR法合成日本血吸虫大陆株 14 3 3蛋白epsilon亚型基因cDNA片段。将其克隆入pGEM T载体 ,经双酶切及PCR鉴定后 ,再亚克隆入 pBK CMV真核表达质粒 ,构建重组质粒pBK Sj14 3 3 ,转染到大肠杆菌BL2 1,双酶切鉴定后 ,通过IPTG的诱导在大肠杆菌BL2 1中进行表达及Western blot鉴定。 结果 RT PCR产物、pGEM T Sj14 3 3及pBK Sj14 3 3分别经双酶切均获得一特异性基因片段 ,其表达产物经SDS PAGE及Western blot鉴定后其分子质量为 3 2ku ,并能被抗 14 3 3多克隆抗体识别。 结论真核表达重组质粒 pBK Sj14 3 3在大肠杆菌中的表达产物是一分子质量为 3 2ku融合蛋白 ,并能被抗 14 3 3多克隆抗体识别。
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| 关 键 词： | 血吸虫 日本 14-3-3蛋白 epsilon亚型 基因表达 Western-blot鉴定 |
| 文章编号： | 1001-6627(2003)06-0358-04 |
| 修稿时间： | 2003年4月10日 |
EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF 14-3-3 SIGNAL TRANSDUCTION PROTEIN EPSILON ISOFORMS GENE FROM SCHISTOSOMA JAPONICUM(CHINESE STRAIN) |
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| TANG Xiao-niu ,WANG Xue-long ,SHEN Ji-long.EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF 14-3-3 SIGNAL TRANSDUCTION PROTEIN EPSILON ISOFORMS GENE FROM SCHISTOSOMA JAPONICUM(CHINESE STRAIN)[J].Journal of Pathogen Biology,2003,16(6):358-361. |
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| Authors: | TANG Xiao-niu WANG Xue-long SHEN Ji-long |
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| Institution: | TANG Xiao-niu 1,WANG Xue-long 2,SHEN Ji-long 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Schistosoma japonicum 14-3-3 protein epsilon isoforms gene expression western-blot identification |
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