ZNF217肿瘤基因shRNA表达载体的构建及鉴定 |
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作者姓名: | 钟梅 孙桂芹 丁彦青 黎静 |
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作者单位: | 南方医科大学南方医院,妇产科,广东,广州,510515;南方医科大学南方医院,病理科,广东,广州,510515 |
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摘 要: | 目的 构建针对ZNF217肿瘤基因的shRNA表达载体,以用于后续的RNAi研究.方法 依据设计shRNA的原则,针对人ZNF217的mRNA序列,设计并合成编码的shRNA的两条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至PGenesil-1质粒,构建重组体PGenesil-ZNF217,进行测序鉴定,然后转染重组体至HO-8910细胞中.转染24 h后流式细胞仪检测转染率.结果 酶切及测序证实质粒PGenesil-ZNF217构建成功,转染24 h的HO-8910细胞发出绿色荧光.结论 成功构建的针对人ZNF217基因shRNA表达质粒PGenesil-ZNF217转染进人卵巢癌细胞株HO-8910细胞,为后续研究以及卵巢癌的基因治疗奠定了基础.
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关 键 词: | shRNA RNAi ZNF217 质粒 |
文章编号: | 1673-4254(2007)02-0234-03 |
收稿时间: | 2006-09-16 |
修稿时间: | 2006-09-16 |
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