| 靶向HBx小干扰RNA表达载体构建及其功能探讨 |
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| 引用本文： | 高国生,翁彭剑,纪礽斌,李德周,李永燕,李红山,丁世雄.靶向HBx小干扰RNA表达载体构建及其功能探讨[J].中国卫生检验杂志,2011(7):1682-1684. |
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| 作者姓名： | 高国生 翁彭剑 纪礽斌 李德周 李永燕 李红山 丁世雄 |
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| 作者单位： | 浙江省宁波市第二医院; |
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| 基金项目： | 宁波市自然科学基金项目资助(2010A610056) |
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| 摘 要： | 目的:设计和构建乙型肝炎病毒(HBV)X基因(HBx)特异性的小干扰RNA(siRNA)体内表达载体,筛选抑制X基因表达的有效siRNA,并初步探讨其对HBV复制功能的影响。方法:以X基因为目的基因,以产生siRNA质粒载体pSilencerTM-U6为表达模板,细胞内转录合成3条siRNA,并构建携带荧光素酶报告基因的重组质粒载体plucF-HBx。将重组质粒载体plucF-HBx与产生siRNA的质粒pSilencerTM-U6共转染HepG2细胞,检测荧光素酶活性以筛选出抑制荧光素酶表达的有效siRNA,逆转录聚合酶链反应检测HBx mRNA的表达,进一步证实siRNA对HBx表达的抑制效果,然后将siRNA转染HepG2.2.15,酶联免疫吸附法和荧光定量PCR检测siRNA对HBV复制的影响。结果:合成的3条siRNA中有1条抑制荧光素酶表达,抑制效率为76.3%,并能特异性抑制HBV的复制。结论:成功构建并筛选到针对X基因表达的有效siRNA质粒,为HBV的基因治疗奠定基础。
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| 关 键 词： | RNA干扰 乙型肝炎病毒 siRNA 表达载体 基因治疗 |
The Construction of expression vector of the short interfering RNA targeting HBV X gene and its function exploration |
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| GAO Guo-sheng,WENG Peng-jian,Ji Reng-bin,LI De-zhou,LI Yong-yan,LI Hong-shan,DING Shi-xiong.The Construction of expression vector of the short interfering RNA targeting HBV X gene and its function exploration[J].Chinses Journal of Health Laboratory Technology,2011(7):1682-1684. |
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| Authors: | GAO Guo-sheng WENG Peng-jian Ji Reng-bin LI De-zhou LI Yong-yan LI Hong-shan DING Shi-xiong |
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| Institution: | GAO Guo-sheng,WENG Peng-jian,Ji Reng-bin,LI De-zhou,LI Yong-yan,LI Hong-shan,DING Shi-xiong(Ningbo NO.2 Hospital,Ningbo Liver Diseases Hospital,Ningbo 315010,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA Interfering HBV Short interfering RNA Expression vectors Gene therapy |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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