| 人FascDNA的克隆及其在大肠杆菌中表达的研究 |
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| 引用本文： | 王希良 朱锡华. 人FascDNA的克隆及其在大肠杆菌中表达的研究[J]. 免疫学杂志, 1998, 14(4): 233-237 |
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| 作者姓名： | 王希良 朱锡华 |
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| 作者单位： | 第三军医大学免疫学教研室 |
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| 摘 要： | 为获得高质量及充足的Ｆａｓ蛋白，采用ＰＣＲ技术调整Ｆａｓ基因的开放阅读框架，使之与生物素化蛋白基因阅读框架一致；缺失了ＦａｓｃＤＮＡ基因的起始密码子并增加一个大肠杆菌偏性终止密码子，构建ＦａｓｃＤＮＡ和生物素化融合原核表达质粒ＰｉｎＰｏｉｎｔ－Ｆａｓ。将重组质粒转入大肠杆菌ＨＢ１０１，经５００ｍｍｏｌＩＰＴＧ在３７℃条件下诱导４ｈ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测融合蛋白在大肠杆菌得以高效表达，表达量为细菌总蛋白的１３．８％。用亲和层析树脂对生物素化融合蛋白进行亲和层析纯化，得到Ｆａｓ重组的蛋白，且表达的Ｆａｓ融合蛋白具有抗体结合活性。此蛋白的表达成功将解决Ｆａｓ膜蛋白不易提取的难题，为深入研究Ｆａｓ提供了良好材料来源
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| 关 键 词： | Fas cDNA 克隆 融合蛋白 大肠杆菌 表达 |
CLONING AND EXPRESSING OF HUMAN FAS cDNA IN E.coli |
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| Wang Xiliang,Zhu Xihua,Huang Yunhui,Liang Bin,Chen Kemin. CLONING AND EXPRESSING OF HUMAN FAS cDNA IN E.coli[J]. Immunological Journal, 1998, 14(4): 233-237 |
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| Authors: | Wang Xiliang Zhu Xihua Huang Yunhui Liang Bin Chen Kemin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Fas Fusion protein E. coli expression |
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