人退变椎间盘髓核细胞体外平面培养的形态学及活性观察 |
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引用本文: | 王锋,郑陈静美,吴小涛.人退变椎间盘髓核细胞体外平面培养的形态学及活性观察[J].中国矫形外科杂志,2013,21(13):1346-1351. |
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作者姓名: | 王锋 郑陈静美 吴小涛 |
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作者单位: | 1. 东南大学附属中大医院骨科,南京,210009 2. 南京医科大学附属南京第一医院心脏研究所,南京,210006 |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目(项目编号:81201423、81272035、81071493、31070876) |
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摘 要: | 目的]观察平面培养体系内人退变椎间盘髓核细胞的形态及活性变化.方法]收集20例人退变椎间盘髓核,分离髓核细胞行平面培养,倒置相差显微镜和HE染色观察髓核细胞的生长过程与形态变化,流式细胞仪量化细胞周期分布和凋亡率,甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学染色髓核细胞聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达,观察平面培养传代对髓核细胞活性和基质合成能力的影响.结果]原代髓核细胞呈类圆形或多角形,平均7d贴壁,31 d融合至95%,P1代髓核细胞呈长梭形或多角形,平均12h贴壁,6.6d融合至95%,两代细胞增殖能力的差异有统计学意义(P<0.01).原代与P1代髓核细胞的细胞浆阳性染色聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原,生长融合至95%后约90%的细胞分布于G1期,约16%的细胞凋亡,两代细胞的细胞活性和基质合成能力无统计学差异(P>0.05).结论]人退变椎间盘髓核细胞体外平面培养将经历显著的形态学变化.传一代后髓核细胞增殖能力提高,但能维持细胞活性以及蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的合成能力.
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关 键 词: | 髓核细胞 平面培养 细胞周期 凋亡 生长动力学 |
Monolayer culture of human nucleus pulposus cells isolated from degenerated intervertebral discs and observation of the change in morphology and viability |
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Abstract: | |
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Keywords: | nucleus pulposus monolayer culture cell cycle apoptosis growth kinetics |
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