人脐带间充质干细胞最适宜培养条件研究

目的:探讨人脐带间充质干细胞(UCMSCs)成功培养扩增的条件,以提高其培养的成功率。方法:无菌条件下采集足月胎儿脐带6份,分离培养UCMSCs,观察比较不同的新鲜程度、不同分离方法在相同的培养条件下对UCMSCs培养的影响,并对优化条件下培养的UCMSCs进行扩增,评估其贴壁细胞形成集落数。对培养得到的细胞进行表面抗原标志检测及其鉴定。结果:从足月胎儿新鲜脐带中采用组织块贴壁的方法,在5%血清浓度的IMDM培养基中,分离培养得到的UCMSCs成功机率最高,且生成集落数最多为(5.3±0.28)×105/0.5cm脐带组织,与双酶法比较存在明显差异(P<0.001);而胶原酶法接种后未见明显贴壁细胞。培养得到的UCMSCs细胞表面表达MSCs相关抗原CD29,但不表达造血细胞相关抗原CD34,表明此种自脐带中分离得到并诱导扩增的成纤维样细胞为间充质干细胞。结论:优化UCMSCs的培养条件,成功地建立稳定的培养方法,可提高UCMSCs培养成功率,为UCMSCs的实验研究和临床应用打下基础。