小鼠ANA-1 巨噬细胞不同极化状态下补体组分mRNA 动态分析

目的：观察小鼠ANA-1巨噬细胞不同极化状态下补体相关组分的mRNA动态变化。方法：〖HTSS〗分别以LPS（1 μg/ml）、IL-4（20 ng/ml）体外刺激小鼠ANA-1细胞，于刺激后3、8、12及24 h时间点收获细胞，Trizol法提取细胞总RNA，采用实时荧光定量PCR法检测IL-1β、CCL2、Arg-1的表达，判断细胞极化情况，检测胞内C3、CfB、CRIg、C1q补体分子mRNA的动态表达。结果：细胞极化情况：刺激3 h后LPS组IL、1β、CCL2 的mRNA表达上调，12 h达高峰（2 -△△Ct 分别为297.0±31.0和19.9±3.3）；在IL-4组中以Arg-1mRNA表达上调显著，于24 h达高峰（2 -△△Ct ：27.3±9.1），提示LPS组细胞向M1方向极化，IL-4组向M2方向极化。细胞内补体mRNA的动态：两极化组的相应补体组分均表现为不同程度的上调，其中：C1q、C3在M2极化组刺激8 h后显著上调，刺激12 h时达高峰（2 -△△Ct 分别为94.9±12.9和11.3±2.4）；CfB因子在M1极化组中显著上调，以刺激12 h表达上调达高峰（2 -△△Ct 为61.4±6.2）；CRIg在两组中均在24 h时表达上调且具有显著性差异（ P <0.05）。结论： LPS/IL-4刺激3 h后，ANA-1细胞分别向M1、M2方向极化；不同补体组分mRNA的表达在两组中均上调但表达谱不同，其中C1q、C3和CRIg在M2极化组中上调更为显著，而CfB因子在M1极化组中显著上调；除CRIg外，C1q、C3及CfB因子均在刺激12 h时上调达高峰，上述结果提示补体组分的变化可能与极化的巨噬细胞功能有关。

Dynamic characteristics of intracellular complement components mRNA in different mouse macrophage ANA-1 polarization