核糖体自噬对脂多糖诱导树突细胞凋亡的影响题录 |
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作者姓名: | 郑丽玉 姚人骐 董宁 吴瑶 姚咏明 |
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作者单位: | 1. 温州医科大学附属第一医院急诊科;2. 解放军总医院医学创新研究部转化医学研究中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金重点项目(82130062, 81730057); |
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摘 要: | 目的探讨脂多糖(LPS)刺激下NUFIP-1介导核糖体自噬在树突细胞(DCs)凋亡中的作用及意义。方法将培养的树突细胞系DC2.4分为空白对照组及LPS刺激6、12、24、48、72 h组(n=5), LPS各亚组加入1 μg/mL LPS培养相应时间。采用Western blot检测各组细胞NUFIP-1及自噬相关蛋白p62和LC3B表达水平, 激光共聚焦显微镜检测NUFIP-1在细胞中的表达与定位及其分别与Lyso-tracker、LC3B共定位情况。将载有沉默空载体NS及沉默慢病毒载体NUFIP-1 siRNA感染DC2.4 (n=3), 以1 μg/mL LPS刺激24 h, 应用流式细胞分析术检测细胞凋亡情况, 并采用Western blot检测凋亡相关蛋白包括胱天蛋白酶(cleaved-caspase-3)和Bcl-2表达水平。多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA), 采用LSD-t法进一步进行组间两两比较。以P<0.05为差异有统计学意义。结果 Western blot结果提示, LPS刺激不同时间(6、12、24、48、72 h)后DC2.4中...
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关 键 词: | NUFIP-1 核糖体自噬 脂多糖 脓毒症 免疫功能紊乱 细胞凋亡 树突细胞 免疫抑制 |
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