| 质粒型单纯疱疹病毒载体的构建及其在真核细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 王晓丹,杨天忠,徐钤,彭朝辉,侯云德,颜子颖.质粒型单纯疱疹病毒载体的构建及其在真核细胞中的表达[J].中华微生物学和免疫学杂志,1997(4). |
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| 作者姓名： | 王晓丹 杨天忠 徐钤 彭朝辉 侯云德 颜子颖 |
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| 作者单位： | 第一军医大学热带病研究室 |
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| 摘 要： | 利用基因工程技术构建成功质粒型Ⅰ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－１）载体ｐＨＳＶ，其中含有ＨＳＶ－１包装信号序列和ＨＳＶ－１复制起点，以及ＨＳＶ－１ＩＥ６８启动子。为验证其构建是否成功，在其ＩＥ６８启动子下游的多克隆位点上插入了Ｅ．ｃｏｌｉＬａｃＺ基因，构建成ｐＨＳＶＬ质粒。用ＨＳＶ－１温度敏感株（ｔｓＫ株）超感染传代细胞后，将这种质粒转染入该细胞，ｐＨＳＶＬ可在辅助病毒ＨＳＶ－１ｔｓＫ（允许温度为３１℃）存在的条件下被包装成病毒颗粒，由此得到的混合病毒含有ＨＳＶ－１ｔｓＫ和ｐＨＳＶＬ假病毒颗粒，收获后再感染培养的Ｖｅｒｏ细胞，原位检测β－半乳糖苷酶活性呈阳性。同时用ｐＨＳＶＬ病毒接种体外培养的ＳＤ大鼠胚胎脊髓运动神经元，用Ｘ－ｇａｌ原位检测β－半乳糖苷酶的活性，亦发现有阳性的神经元存在。说明载体ｐＨＳＶＬ携带的报告基因ｌａｃＺ在这两种真核细胞中均得以正确表达。报告基因可为其它目的基因所代替，可用于神经生理、病理以及神经系统疾病基因治疗的实验研究。
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| 关 键 词： | 单纯疱疹病毒 载体 pHSVL质粒 基因转移 |
Construction of defective plasmid derived herpes simplex virus type 1 vector pHSVL and its expression in eucaryotic cells |
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| Wang Xiaodan ,Yang Tianzhong,Xu Qian,et al..Construction of defective plasmid derived herpes simplex virus type 1 vector pHSVL and its expression in eucaryotic cells[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,1997(4). |
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| Authors: | Wang Xiaodan Yang Tianzhong Xu Qian |
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| Institution: | Wang Xiaodan *,Yang Tianzhong,Xu Qian,et al. *The First Military Medical University,Guangzhou 510515 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Herpes simplex virus Vector Plasmid pHSVL Gene transfer |
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