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体外RNA干扰抑制Ezrin表达对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响
引用本文:谢柏臻,陈安民,郭风劲,宋登新,祁军,陈超.体外RNA干扰抑制Ezrin表达对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响[J].中国癌症杂志,2008,18(2):81-85.
作者姓名:谢柏臻  陈安民  郭风劲  宋登新  祁军  陈超
作者单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,湖北武汉,430030
基金项目:国家973计划“恶性肿瘤侵袭和转移的机理及分子阻遏”(No:2002CB513100).
摘    要:背景与目的:细胞膜-细胞骨架联接蛋白(埃兹蛋白,Ezrin)参与了许多细胞的功能,包括细胞黏附、细胞运动以及细胞的生存.最近的许多研究表明Ezrin参与调控了肿瘤的侵袭与转移.然而,在骨肉瘤中,Ezrin所扮演的重要角色还没有被很清晰的阐明.本研究拟探讨Ezrin蛋白对人骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:以骨肉瘤MG-63细胞系为研究对象,针对Ezrin编码基因设计小干扰RNA片段,重组其shRNA(short hairpin RNA)表达载体转染入细胞,筛选稳定表达的克隆,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(Western-Blot)方法检测转染后Ezrin的mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell法检测侵袭能力的变化.结果:RT-PCR和Western blot检测显示shRNA对Ezrin在基因和蛋白水平均有显著下调作用.骨肉瘤细胞生长速度减慢,处于分裂期的细胞比例有明显的下降,由25.05%下降到18.36%,而G1期细胞比例则由60.57%上升到67.65%.穿过人工基底膜的细胞数量也明显减少,由35.9±5.6减少为22.5±2.8(P<0.01).结论:Ezrin在骨肉瘤的增殖和侵袭过程中发挥有重要作用,可能成为抑制肿瘤增殖和转移的关键性分子.

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文章编号:1007-3639(2008)02-0081-05
收稿时间:2007-10-09
修稿时间:2007-12-25

The influence of down-regulation of Ezrin expression by short hairpin RNA on the proliferation and invasion of osteosarcoma
XIE Bo-zhen,CHEN An-min,GUO Feng-jing,SONG Deng-xin,QI Jun,CHEN Chao.The influence of down-regulation of Ezrin expression by short hairpin RNA on the proliferation and invasion of osteosarcoma[J].China Oncology,2008,18(2):81-85.
Authors:XIE Bo-zhen  CHEN An-min  GUO Feng-jing  SONG Deng-xin  QI Jun  CHEN Chao
Abstract:
Keywords:osteosarcoma  Ezrin  siRNA
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