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腺病毒载体介导的ING4基因对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用
引用本文:井莹莹,杨吉成,缪竞诚,盛伟华,胡志清,单云波,刘铁连,韩亚丽,包婉蓉.腺病毒载体介导的ING4基因对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用[J].中国免疫学杂志,2009,25(3).
作者姓名:井莹莹  杨吉成  缪竞诚  盛伟华  胡志清  单云波  刘铁连  韩亚丽  包婉蓉
作者单位:苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室,苏州,215123
基金项目:苏州大学医学发展基金 
摘    要:目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用.方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人ING-4氨基酸序列相同的重组腺病毒子(Ad-ING4),感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING4在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法和流式细胞技术检测ING4基因表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;荧光共聚焦显微镜观察MG-63细胞凋亡的形态学变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因表达对MG-63细胞巾的Bax、Bcl-2基闪表达的影响.结果:基因测序和PCR分析结果显示,人源化改造的小鼠ING4分子氨基酸序列与人ING4分子完全相同,成功构建了Ad-ING4腺病毒表达载体,在MG-63细胞中ING4基因的表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,出现典型细胞凋亡形态学变化,ING4基因表达可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡.结论:转染ING4基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡,该现象可能是通过改变Bax,Bcl-2表达水平来发挥抗肿瘤作用的.

关 键 词:ING4基因  腺病毒载体  MG-63人骨肉瘤细胞  凋亡

The growth-inhibitory effect of recombinant ING4-Adenovirus on MG-63 osteosarcoma cells
JING Ying-Ying,YANG Ji-Cheng,MIAO Jing-Cheng,SHENG Wei-Hua,HU Zhi-Qing,SHAN Yun-Bo,LIU Tie-Lian,HAN Ya-Li,BAO Wan-Rong.The growth-inhibitory effect of recombinant ING4-Adenovirus on MG-63 osteosarcoma cells[J].Chinese Journal of Immunology,2009,25(3).
Authors:JING Ying-Ying  YANG Ji-Cheng  MIAO Jing-Cheng  SHENG Wei-Hua  HU Zhi-Qing  SHAN Yun-Bo  LIU Tie-Lian  HAN Ya-Li  BAO Wan-Rong
Abstract:
Keywords:
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