敲除成纤维细胞生长因子2基因抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移侵袭并促进细胞凋亡

目的 探索成纤维细胞生长因子2(FGF2)敲除对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖、迁移侵袭和凋亡的影响及作用机制。方法 将FGF2-sgRNA基因序列转入载体lenticrispv2构建CRISPR-cas9-FGF2稳转细胞系，Western blot检测CRISPR-cas9-FGF2稳转细胞系FGF2的蛋白敲除情况及相关凋亡蛋白指标和周期蛋白指标，将MCF-7细胞分为CRISPR-cas9-NC组（对照组）和CRISPR-cas9-FGF2组（FGF2基因敲除组），使用CCK-8实验和细胞集落形成实验检测细胞增殖能力，细胞划痕实验和transwell实验检测细胞迁移侵袭能力，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 （1）设计的三条FGF2-sgRNA序列均与载体lenticrispv2连接成功。（2）用Western blot检测表明FGF2-sgRNA1敲除作用更明显（P <0.000 1）。（3）与对照组细胞相比，FGF2基因敲除组细胞的增殖、迁移侵袭能力明显降低（P <0.01）；周期蛋白CDK2和cyclinA蛋白表达显著降低（P <0.001）,Bax促凋亡蛋...