基于miRNA调控网络探究miR-653在肺癌干细胞干性维持中的作用

目的:基于miRNA调控网络探究miR-653在肺癌干细胞干性维持中的作用及其相关机制。方法:miRNA-seq检测肺癌患者肿瘤组织和癌旁组织，根据差异miRNA绘制调控网络，并对靶基因进行KEGG分析。通过脂质体转染法将miR-NC、miR-653、oe-NC、oe-MYC转染至H460肺癌细胞系，分组为：miR-NC组、miR-653组、miR-653+oe-NC组、miR-653+oe-MYC组。qRT-PCR检测各组miR-653、MYC表达；流式细胞术检测CD133、CD24蛋白表达；CCK8检测细胞增殖水平；有限稀释法检测细胞成球比例；通过荧光素酶报告基因检测试剂盒检测miR-653和MYC靶向性。结果:与癌旁组织比较，肿瘤组织中有326个miRNA表达升高，363个miRNA表达降低，其中miR-653表达显著降低(P<0.05)。调控网络预测miR-653靶向22个mRNA,参与细胞干性维持等信号通路。在野生型MYC中，miR-653组荧光强度低于miR-NC组(P<0.05)。与miR-NC组比较，miR-653组miR-653表达升高，MYC表达降低；C...