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AKTIP基因真核表达载体的构建及其在GES-1细胞中的表达
引用本文:利荣乔,黄俏佳.AKTIP基因真核表达载体的构建及其在GES-1细胞中的表达[J].第四军医大学学报,2008,29(23):2127-2130.
作者姓名:利荣乔  黄俏佳
作者单位:南京军区福州总医院分子医学研究中心,福建福州350025
基金项目:南京军区福州总医院留学归围人员专项基金  
摘    要:目的:构建人蛋白激酶B相瓦作用蛋白(AKTIP)基因编码区序列(cDNA)的真核表达载体,观察其在GES-1细胞中的表达.方法:从健康人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增AKTIP cDNA的全长序列后克隆入pcDNA3.1/myc-His(-)A质粒中,经酶切鉴定及DNA测序证实后,应用脂质体将AKTIP基因转染入人胃黏膜细胞株GES-1细胞中,通过Western Blot检测其在GES-1细胞中的表达情况.结果:重组载体经酶切鉴定和测序证实目的基因正确无误,Western Blot结果显示AKTIP基因在GES-1细胞具有良好的表达.结论:成功地构建了pcDNA3.1/myc-His(-)A-AKTIP真核表达载体,并成功地在GES-1细胞中进行了表达,为进一步研究AKTIP的功能和结构奠定了基础.

关 键 词:蛋白激酶B相互作用蛋白  逆转录-PCR  基因克隆  基因转染  蛋白质印迹技术

Construction of eukaryotic expression vector of AKTIP gene and its expression in GES-1 cells
LI Rong-Qiao,HUANG Qiao-Jia.Construction of eukaryotic expression vector of AKTIP gene and its expression in GES-1 cells[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2008,29(23):2127-2130.
Authors:LI Rong-Qiao  HUANG Qiao-Jia
Abstract:
Keywords:
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