| 人ADAM17启动子荧光素酶报告质粒的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 张春利,蔡徐山,宦宇,齐结华,王东江. 人ADAM17启动子荧光素酶报告质粒的构建与鉴定[J]. 基础医学与临床, 2019, 39(9): 1305-1309 |
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| 作者姓名： | 张春利 蔡徐山 宦宇 齐结华 王东江 |
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| 作者单位： | 上海市嘉定区妇幼保健院 检验科,上海,201821;上海市嘉定区妇幼保健院 检验科,上海,201821;上海市嘉定区妇幼保健院 检验科,上海,201821;上海市嘉定区妇幼保健院 检验科,上海,201821;上海市嘉定区妇幼保健院 检验科,上海,201821 |
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| 基金项目： | 上海市嘉定区卫计委资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建人去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)启动子的荧光素酶报告质粒,对不同位点进行定点突变,分析其转录活性。方法通过生物信息学分析ADAM17启动子区域的叉头转录因子M1(FoxM1)结合位点,以人胃癌细胞系MGC-803基因组为模板,PCR扩增ADAM17基因启动子-1 365^+51片段,连接到荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中;对FoxM1结合的3个位点进行定点突变;转染至293T细胞后用双荧光素酶报告系统分析其转录活性。结果测序结果显示,ADAM17启动子荧光素酶报告基因及其突变体均构建成功;与pGL3-basic组相比,pGL3-ADAM17(-1 365^+51)组介导的荧光素酶活性明显升高(P<0.05);与对照组相比,过表达FoxM1组介导的荧光素酶活性明显升高(P<0.05),且pGL3-ADAM17(-1 365^+51)组高于突变组(P<0.05)。结论成功构建了人ADAM17启动子荧光素酶报告基因及其突变体,初步验证了ADAM17受转录因子FoxM1的转录调控。
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| 关 键 词： | 去整合素-金属蛋白酶17 启动子 荧光报告质粒 叉头转录因子M1 |
Construction and identification of luciferase reporter plasmid for human ADAM17 promoter |
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| ZHANG Chun-li,CAI Xu-shan,HUAN Yu,QI Jie-hua,WANG Dong-jiang. Construction and identification of luciferase reporter plasmid for human ADAM17 promoter[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2019, 39(9): 1305-1309 |
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| Authors: | ZHANG Chun-li CAI Xu-shan HUAN Yu QI Jie-hua WANG Dong-jiang |
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| Affiliation: | (Department of Clinical Laboratory,Maternal and Child Health Hospital of Jiading District,Shanghai 201821,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ADAM17 promoter luciferase reporter plasmid FoxM1 |
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