| 免疫毒素IL-18-PE38原核表达载体的构建及其鉴定 |
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| 引用本文： | 李虹,李明远,吕梅励,蒋忠华,张林. 免疫毒素IL-18-PE38原核表达载体的构建及其鉴定[J]. 航天医学与医学工程, 2005, 18(6): 395-398 |
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| 作者姓名： | 李虹 李明远 吕梅励 蒋忠华 张林 |
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| 作者单位： | 四川大学华西基础与法医学院微生物学教研室,四川成都,610041;Department of Microbiology, West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University, Chengdu Sichuan 610041;The Key Lab of Biotherapy of Human Diseases, Sichuan University, Chengdu Sichuan 610041 |
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| 基金项目： | Supported by a grant of “863” foundation（2002AA214101） |
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| 摘 要： | 目的 构建绿脓杆菌外毒素PE38融合鼠IL-18基因的原核表达载体,并鉴定其产物在大肠杆菌中的表达.方法 首先经逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）获得小鼠IL-18基因,再通过酶切及连接反应,构建小鼠IL-18与PE38融合基因的原核表达载体PRKL-IL18-PE38,重组载体经PCR、限制性内切酶及DNA序列测定证实连接片段正确后,转染感受态大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和蛋白免疫印迹法分别测定其相对分子质量及特异性.结果 成功构建了IL-18-PE38免疫毒素的原核表达载体,重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达,表达产物的相对分子质量与预期值一致,且所表达蛋白可被抗IL-18的特异性抗体所识别.结论 获得了IL-18-PE38融合基因在原核系统的表达,为进一步研究其对Th1细胞的靶向细胞毒性及临床应用奠定了基础.
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| 关 键 词： | IL-18-PE38 重组免疫毒素 原核表达 基因构建 |
| 文章编号： | 1002-0837（2005）06-0395-04 |
| 收稿时间： | 2005-01-10 |
| 修稿时间： | 2005-01-10 |
Genetic Construction and Characterization of Murine Interleukin-18 Immunotoxin with a Truncated Pseudomonas Exotoxin |
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| LI Hong,LI Ming-yuan,LV Mei-li,JIANG Zhong-hua,ZHANG Lin. Genetic Construction and Characterization of Murine Interleukin-18 Immunotoxin with a Truncated Pseudomonas Exotoxin[J]. Space Medicine & Medical Engineering, 2005, 18(6): 395-398 |
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| Authors: | LI Hong LI Ming-yuan LV Mei-li JIANG Zhong-hua ZHANG Lin |
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| Affiliation: | 1. Department of Microbiology, West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University, Chengdu Sichuan 610041 ;2. The Key Lab of Biotherapy of Human Diseases, Sichuan University, Chengdu Sichuan 610041 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | IL-18-PE38 recombinant immunotoxins prokaryotic expression gene construction |
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