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RNA干扰survivin基因对人肝癌HepG2细胞增殖影响
引用本文:杨敬敬,雷炜,于壮. RNA干扰survivin基因对人肝癌HepG2细胞增殖影响[J]. 齐鲁医学杂志, 2009, 24(3). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0341.2009.03.004
作者姓名:杨敬敬  雷炜  于壮
作者单位:青岛大学医学院附属医院肿瘤科,山东,青岛,266003
摘    要:目的 探讨RNA干扰技术抑制survivin基因表达对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖的影响.方法 构建针对人肝癌HepG2细胞 survivin基因3个不同靶序列的 shRNA真核表达载体pshRNA-survivin-323/387/52,用Lipofectamine 2000脂质体介导转染法转染质粒, 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测survivin 基因mRNA表达水平.选择对survivin基因表达抑制作用最强的shRNA载体转染HepG2细胞后, 免疫细胞化学法(ICC)检测HepG2细胞survivin蛋白的表达情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞的增殖情况.结果 与对照组比较,构建的3个shRNA质粒中pshRNA-survivin-387转染组survivin mRNA水平下调,差异有显著性(F=18.64,q=4.293~4.925,P<0.05),而pshRNA-survivin-323/52质粒对survivin的表达及mRNA水平的影响差异无显著性(q=0.631~0.126,P>0.05).转染pshRNA-survivin-387质粒的HepG2细胞survivin蛋白表达较对照组明显下调(F=68.39,q=13.71、14.37,P<0.01),其增殖能力较对照组显著下降(F=20.06~47.65,q=11.186、 12.601,P<0.01).结论 构建的针对人survivin基因387位靶序列的shRNA表达载体pshRNA-survivin-387可显著抑制survivin的表达及HepG2细胞增殖.

关 键 词:肝肿瘤  RNA干扰  细胞增殖

EFFECT OF RNA INTERFERENCE TARGETING SURVIVIN GENE ON THE PROLIFERATION OF HEPATOCELLULAR CARCINOMA CELL LINE HepG2
YANG JING-JING,LEI WEI,YU ZHUANG. EFFECT OF RNA INTERFERENCE TARGETING SURVIVIN GENE ON THE PROLIFERATION OF HEPATOCELLULAR CARCINOMA CELL LINE HepG2[J]. Medical Journal of Qilu, 2009, 24(3). DOI: 10.3969/j.issn.1008-0341.2009.03.004
Authors:YANG JING-JING  LEI WEI  YU ZHUANG
Abstract:
Keywords:Survivin
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