肿瘤坏死因子凋亡相关配体基因的克隆和表达 |
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引用本文: | 苏海川,赵玉红,张惠中,范清宇. 肿瘤坏死因子凋亡相关配体基因的克隆和表达[J]. 医学争鸣, 2003, 24(16): 1482-1484 |
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作者姓名: | 苏海川 赵玉红 张惠中 范清宇 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所,陕西,西安,710038 2. 第四军医大学基础部免疫学教研室,陕西,西安,710033 |
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摘 要: | 目的:克隆、表达和鉴定肿瘤坏死因子凋亡相关配体(TRAIL).方法:从培养的人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得TRAIL基因.将该基因克隆到pGEM-Teasy载体中,测序鉴定.将TRAIL基因插入pBV220表达载体中,42℃诱导表达4~5h,进行SDS-PAGE分析.免疫印迹法鉴定TRAIL蛋白的表达.结果:DNA测序证明,获得了TRAIL基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致.SDSPAGE分析表明,TRAIL蛋白获得高效表达,分子质量为17ku,表达量约占菌体总蛋白的300k,.免疫印迹法鉴定显示,该蛋白可与鼠抗人TRAIL mAb产生阳性反应.结论:成功克隆和表达了TRAIL基因.
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关 键 词: | TRAIL 逆转录 聚合酶链反应 基因表达 |
文章编号: | 1000-2790(2003)16-1482-03 |
修稿时间: | 2003-03-10 |
Cloning and expression of human TRAIL gene |
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Abstract: | |
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Keywords: | TRAIL reverse trancriptase polymerase chain reaction gene expression |
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