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大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒重组体构建
引用本文:钟建辉,邱鹏新,颜光美.大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒重组体构建[J].热带医学杂志,2006,6(1):2-4,F0003.
作者姓名:钟建辉  邱鹏新  颜光美
作者单位:1. 中山大学基础医学院药理学教研室,广州,510080;中山大学附属第一医院肾内科,广州,510080
2. 中山大学基础医学院药理学教研室,广州,510080
摘    要:目的 构建大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒介导的表达载体。方法 提取大鼠脑组织总RNA.用逆转录PCR扩增DNA多聚酶β(POLB)的编码区,与T载体连接,作DNA测序后,酶切POLB基因并连入腺病毒穿梭质粒pAdTraek-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。酶切鉴定,重组腺病毒质粒(pAd-polb)Lipofectamine2000转染293细胞,用293细胞扩增重组腺病毒。结果 8个TA克隆中有2个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLB cDNA序列完全一致。DNA序列正确的POLB重组腺病毒质粒Ad-polb转染293细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光。结论 用TA克隆和AdEasy系统,成功构建了大鼠DNA多聚酶β的腺病毒重组体。

关 键 词:DNA多聚酶β  逆转录PCR  TA克隆  腺病毒载体
文章编号:1672-3619(2006)01-0002-03
收稿时间:2005-07-29
修稿时间:2005-09-20

Cloning of Rat DNA Polymerase β and Construction of Its Recombinant Adenoviruses
ZHONG Jian-hui,QIU Peng-xin,YAN Guang-mei.Cloning of Rat DNA Polymerase β and Construction of Its Recombinant Adenoviruses[J].Journal Of Tropical Medicine,2006,6(1):2-4,F0003.
Authors:ZHONG Jian-hui  QIU Peng-xin  YAN Guang-mei
Abstract:
Keywords:
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