低氧诱导因子-3α对胎盘滋养层细胞生长的影响 |
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引用本文: | 张丹,孙大光,张璐,马旭,夏红飞.低氧诱导因子-3α对胎盘滋养层细胞生长的影响[J].生殖医学杂志,2021(4):507-515. |
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作者姓名: | 张丹 孙大光 张璐 马旭 夏红飞 |
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作者单位: | 国家卫生健康委科学技术研究所遗传优生中心;北京协和医学院研究生院;重庆市人口和计划生育科学技术研究院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(81771590);中央级公益性科研院所基本科研业务费(2020GJZ02)。 |
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摘 要: | 目的研究低氧诱导因子-3α(HIF-3α)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR8/SVneo)生物学行为的影响。方法构建人HIF-3α过表达载体(pcDNA3.1-HIF-3α),并筛选HIF-3α抑制剂(HIF-3αsiRNA)最佳靶序列;用2.5μg的pcDNA3.1-HIF-3α质粒和75 pmol/L的HIF-3αsiRNA分别转染HTR8/SVneo细胞作为转染组,同时各自设立阴性转染组。采用EdU法和MTT法检测细胞增殖和细胞活力水平;用细胞流式法检测细胞凋亡水平;并用细胞培养小室(Transwell)法检测细胞浸润和迁移的能力。结果蛋白质印迹法(Western Blot)结果表明成功构建了过表达载体pcDNA3.1-HIF-3α,并筛选到HIF-3αsiRNA#2是最佳抑制靶序列(P<0.05)。EdU实验结果显示,过表达HIF-3α使细胞的增殖显著增强(P<0.05),敲低HIF-3α则使细胞的增殖显著下降(P<0.05)。MTT法检测发现,过表达HIF-3α后细胞活力无显著差异(P>0.05);敲低HIF-3α后细胞活力显著升高(P<0.05)。细胞流式法检测发现,HIF-3α过表达有降低HTR8/SVneo细胞早期凋亡的趋势,但无显著差异(P>0.05);HIF-3α敲低后细胞凋亡无显著差异(P>0.05)。Transwell小室法检测发现,HIF-3α过表达使细胞的迁移以及浸润显著增强(P<0.05),而HIF-3α敲低后细胞的迁移以及浸润显著下降(P<0.05)。结论HIF-3α是调节HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和浸润能力的重要因子。
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关 键 词: | 人胎盘绒毛膜滋养层细胞 低氧诱导因子-3α 细胞活性 细胞迁移和浸润 |
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