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反义寡核苷酸阻遏角蛋白14的表达
引用本文:陈玉欣,李巍,樊建勇,刘玉峰,高天文. 反义寡核苷酸阻遏角蛋白14的表达[J]. 中华皮肤科杂志, 2004, 37(4): 224-226
作者姓名:陈玉欣  李巍  樊建勇  刘玉峰  高天文
作者单位:第四军医大学西京医院皮肤科 西安 710032
基金项目:中华医学会皮肤科分会科研基金
摘    要:目的 研究脂质体介导角蛋白K14反义寡核苷酸(ASODN)阻遏人角质形成细胞K14基因和蛋白的表达及抑制体外增殖活性的效果.方法 人表皮角质形成细胞原代培养,3~10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导入角质形成细胞,应用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化(SABC)方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响.结果 脂质体介导的K14反义寡核苷酸转染角质形成细胞后,能有效地抑制角质形成细胞中K14基因的表达;48h后可阻遏K14蛋白表达;流式细胞仪检测见反义寡核苷酸处理组细胞周期发生明显改变,G1期细胞百分率上升,S期细胞百分率下降.而正义寡核苷酸1组、错义寡核苷酸组及空白对照组均无此变化.结论 应用反义技术封闭K14基因,可以阻遏角蛋白K14基因和蛋白的表达,并可以抑制体外培养的角质形成细胞的增殖.

关 键 词:寡核苷酸类  反义  角蛋白  角蛋白细胞  脂质体  
收稿时间:2003-06-11
修稿时间:2003-06-11

Downregulation of K14 Genes and Protein Expression by Liposome Conjugated Antisense Oligonucleotides in Keratinocytes
CHEN Yu-xin,LI Wei,FAN Jian-yong,LIU Yu-feng,GAO Tian-wen. Downregulation of K14 Genes and Protein Expression by Liposome Conjugated Antisense Oligonucleotides in Keratinocytes[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2004, 37(4): 224-226
Authors:CHEN Yu-xin  LI Wei  FAN Jian-yong  LIU Yu-feng  GAO Tian-wen
Affiliation:Centre of Dermatology and Venereology of Chinese PLA, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China
Abstract:
Keywords:Oligonucleotides   antisense  Keratin  Keratinocytes  Liposomes
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