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| 重组载体pLNCX/iNOS的构建及其在NIH3T3细胞中滴度的测定 | |
| 引用本文： | 陈宝安,朱梁军,朱敏生,潘英,杜娟,陈苏宁,王骏,邵泽叶.重组载体pLNCX/iNOS的构建及其在NIH3T3细胞中滴度的测定[J].东南大学学报(医学版),2002,21(2):137-139. |
| 作者姓名： | 陈宝安 朱梁军 朱敏生 潘英 杜娟 陈苏宁 王骏 邵泽叶 |
| 作者单位： | 1. 东南大学附属中大医院,血液科,江苏,南京,210009 2. 江苏省肿瘤研究所,江苏,南京,210009 3. 南京军区军事医学研究所,江苏,南京,210004 |
| 基金项目： | 江苏省科委自然科学基金资助项目(BK99126) |
| 摘 要： | 目的 :构建重组质粒pLNCX/iNOS。方法 :用PCR技术从pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长cDNA ,与逆转录病毒pLNCX构建重组质粒pLNCX/iNOS ;通过脂质体介导把重组质粒转染入包装细胞PA3 17中 ,经G418筛选出抗性克隆。通过NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果 :经过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定重组质粒构建正确。G418筛选出 16个抗性克隆 ,能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒。NIH3T3细胞测定病毒滴度为 2 .1×10 4CFU·ml-1。结论 :逆转录病毒载体pLNCX可有效地介导iNOS的转染 |
| 关 键 词： | 一氧化氮合酶 逆转录病毒 基因转染 聚合酶链反应 NOS 肿瘤治疗 一氧化氮 |
| 文章编号： | 1671-6264(2002)02-0137-03 |
| 修稿时间： | 2002年4月12日 |
Construction of recombinant pLNCX/iNOS and titer assay in NIH3T3 cells |
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| CHEN Bao an ,ZHU Liang jun ,ZHU Min sheng ,PAN Ying ,DU Juan ,CHEN Su ning ,WANG Jun ,SHAO Ze ye.Construction of recombinant pLNCX/iNOS and titer assay in NIH3T3 cells[J].Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed,2002,21(2):137-139. | |
| Authors: | CHEN Bao an ZHU Liang jun ZHU Min sheng PAN Ying DU Juan CHEN Su ning WANG Jun SHAO Ze ye |
| Institution: | CHEN Bao an 1,ZHU Liang jun 2,ZHU Min sheng 3,PAN Ying 3,DU Juan 1,CHEN Su ning 1,WANG Jun 1,SHAO Ze ye 1 |
| Abstract: | |
| Keywords: | nitric oxide synthase retroviral vector gene transfection polymerase chain reaction |
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