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重组载体pLNCX/iNOS的构建及其在NIH3T3细胞中滴度的测定
引用本文:陈宝安,朱梁军,朱敏生,潘英,杜娟,陈苏宁,王骏,邵泽叶.重组载体pLNCX/iNOS的构建及其在NIH3T3细胞中滴度的测定[J].东南大学学报(医学版),2002,21(2):137-139.
作者姓名:陈宝安  朱梁军  朱敏生  潘英  杜娟  陈苏宁  王骏  邵泽叶
作者单位:1. 东南大学附属中大医院,血液科,江苏,南京,210009
2. 江苏省肿瘤研究所,江苏,南京,210009
3. 南京军区军事医学研究所,江苏,南京,210004
基金项目:江苏省科委自然科学基金资助项目(BK99126)
摘    要:目的 :构建重组质粒pLNCX/iNOS。方法 :用PCR技术从pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长cDNA ,与逆转录病毒pLNCX构建重组质粒pLNCX/iNOS ;通过脂质体介导把重组质粒转染入包装细胞PA3 17中 ,经G418筛选出抗性克隆。通过NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果 :经过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定重组质粒构建正确。G418筛选出 16个抗性克隆 ,能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒。NIH3T3细胞测定病毒滴度为 2 .1×10 4CFU·ml-1。结论 :逆转录病毒载体pLNCX可有效地介导iNOS的转染

关 键 词:一氧化氮合酶  逆转录病毒  基因转染  聚合酶链反应  NOS  肿瘤治疗  一氧化氮
文章编号:1671-6264(2002)02-0137-03
修稿时间:2002年4月12日

Construction of recombinant pLNCX/iNOS and titer assay in NIH3T3 cells
CHEN Bao an ,ZHU Liang jun ,ZHU Min sheng ,PAN Ying ,DU Juan ,CHEN Su ning ,WANG Jun ,SHAO Ze ye.Construction of recombinant pLNCX/iNOS and titer assay in NIH3T3 cells[J].Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed,2002,21(2):137-139.
Authors:CHEN Bao an  ZHU Liang jun  ZHU Min sheng  PAN Ying  DU Juan  CHEN Su ning  WANG Jun  SHAO Ze ye
Institution:CHEN Bao an 1,ZHU Liang jun 2,ZHU Min sheng 3,PAN Ying 3,DU Juan 1,CHEN Su ning 1,WANG Jun 1,SHAO Ze ye 1
Abstract:
Keywords:nitric oxide synthase  retroviral vector  gene transfection  polymerase chain reaction
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