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腺病毒介导的T-bet基因转染诱导Th1型淋巴细胞分化
引用本文:陈祖兵,陶剑平,梁力建,刘晓平,胡文杰,李绍强. 腺病毒介导的T-bet基因转染诱导Th1型淋巴细胞分化[J]. 中国病理生理杂志, 2005, 21(6): 1167-1170. DOI: 1000-4718
作者姓名:陈祖兵  陶剑平  梁力建  刘晓平  胡文杰  李绍强
作者单位:1. 中山大学附属第一医院肝胆外科,广东,广州,510080
2. 中山大学医学院微生物教研室,广东,广州,510080
3. 北京大学附属深圳医院肝胆外科,广东,深圳,518036
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.30371327,No.30371386),深圳卫生科技项目(No.200204093)
摘    要:目的:构建含有T细胞转录因子T-bet(T-box expressed in T cells)的重组腺病毒Ad.T-bet,并诱导Th1型淋巴细胞分化。 方法: 采用RT-PCR的方法从健康人外周血淋巴细胞的总RNA中克隆T-bet基因,亚克隆入腺病毒穿梭载体成为pAdtrack-CMV.T-bet,与腺病毒基因组载体pAdeasy-1同源重组为pAd.T-bet,经Pac I酶切后转染293细胞,用 Western blotting 和RT-PCR的方法鉴定Ad.T-bet;联合腺病毒和脂质体以感染倍数(m.o.i) 5000感染活化的淋巴细胞,用ELISA 法检测培养液中IFN-γ含量。 结果: 采用RT-PCR方法从健康人外周血淋巴细胞中扩增出T-bet基因,构建出重组腺病毒Ad.T-bet,Western blotting 和RT-PCR均检测出细胞内T-bet蛋白表达;联合Ad.T-bet和脂质体感染淋巴细胞诱导Th1型细胞因子IFN-γ持续高表达。 结论: 重组腺病毒Ad.T-bet有效诱导Th1型细胞分化,有望成为改变肿瘤患者免疫抑制状态的有效方法。

关 键 词:腺病毒载体  淋巴细胞  基因  T-bet
文章编号:1000-4718(2005)06-1167-04
收稿时间:2004-11-15
修稿时间:2004-01-07

Adenovirus-mediated T-bet gene transfers into lymphocyte to induce type-1 T-helper differentiation
CHEN Zu-bing,TAO Jian-ping,LIANG Li-jian,LIU Xiao-ping,HU Wen-jie,LI Shao-qiang. Adenovirus-mediated T-bet gene transfers into lymphocyte to induce type-1 T-helper differentiation[J]. Chinese Journal of Pathophysiology, 2005, 21(6): 1167-1170. DOI: 1000-4718
Authors:CHEN Zu-bing  TAO Jian-ping  LIANG Li-jian  LIU Xiao-ping  HU Wen-jie  LI Shao-qiang
Affiliation:1Department of Hepatobiliary Surgery,The First Affiliated Hospital,2Department of Microbiology,Sun Yat-sen Medical College, Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;3Department of Hepatobiliary Surgery,The Shenzhen Hospital of Beijing University,Shenzhen 518036,China
Abstract:
Keywords:Adenovirus vector  Lymphocytes  Genes   T-bet
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