伊立替康对食管癌细胞放射增敏作用及核因子κB活性的影响研究

目的 探讨伊立替康（CPT-11）对食管癌EC109细胞的放射增敏作用及核因子（NF）κB活性的影响。方法 采用MTT法观察不同浓度CPT-11（20、50、100、200 μmol／L）作用24、48及72 h后的细胞存活率以筛选低细胞毒性药物浓度进行后续实验；根据实验设计分为对照组、单纯照射组和CPT-11+照射组，采用克隆形成实验检测经不同剂量X线（0、2、4、6、8和10 Gy）的存活分数（SF）并通过单击多靶模型拟合细胞存活曲线计算增敏比（SER），采用流式细胞技术检测各组处理48 h后的凋亡率和caspase-3活化率，Foci焦点形成实验检测各组的DNA损伤情况，Western blotting检测各组NF-κB p65和IκB α的蛋白水平，实时定量PCR（qPCR）检测各组的Rad51水平。结果 在20～200 μmol／L范围内，随CPT-11浓度增加，EC109细胞的增殖抑制率升高，抑制效应呈浓度和时间依赖方式，差异有统计学意义（P＜0.05）。选取与CPT-11 20%抑制浓度（IC₂₀）接近的浓度（25 μmol／L）进行增敏实验。CPT-11+照射组的SF低于单纯照射组，且CPT-11+照射组的D0为1.39±0.14，单纯照射组的D0为2.46±0.17，SER为1.77。与对照组和单纯照射组比较，CPT-11+照射组的凋亡率、caspase 3活化率及Foci焦点数目均升高，而Rad51水平降低，差异有统计学意义（P＜005）。CPT-11+照射组的NF-κB p65水平低于其余两组，且IκB-α水平高于其余两组（P＜0.05）。结论 CPT-11可抑制食管癌EC109细胞增殖并具有放射增敏作用，同时诱导凋亡，可能与抑制NF-κB途径有关。