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shRNA靶向沉默Eag 1钾通道对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期及cyclin D1/E表达的影响
引用本文:陈志达,戴立林,吴采荣,曾文容,熊远飞,吴进.shRNA靶向沉默Eag 1钾通道对骨肉瘤细胞增殖、细胞周期及cyclin D1/E表达的影响[J].临床肿瘤学杂志,2016,21(10):874-878.
作者姓名:陈志达  戴立林  吴采荣  曾文容  熊远飞  吴进
作者单位:363000.福建漳州 厦门大学附属东南医院骨科
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81402217)
摘    要:目的 探讨短发夹RNA(shRNA)靶向沉默Ether-go-go 1(Eag1)钾通道对骨肉瘤MG-63细胞增殖、细胞周期及cyclin D1/E表达的影响。 方法 使用成功构建的Ad5-Eag1-shRNA表达载体转染MG-63细胞(抑制组),同时设转染无义序列(Ad5-Control-shRNA)的空转染组及不进行任何处理的对照组。采用逆转录聚合酶链式反应和Western blotting检测Ad5-Eag1-shRNA转染骨肉瘤MG-63细胞后的Eag1 mRNA和蛋白水平,分别采用CCK-8法和克隆形成实验检测各组的细胞增殖情况,流式细胞仪和Western blotting分别检测各组的细胞周期变化和细胞周期蛋白(cyclin D1和cyclin E)的蛋白水平。建立裸鼠骨肉瘤异种移植模型并测量各组裸鼠肿瘤体积的变化情况。结果 抑制组的Eag1 mRNA和蛋白水平均低于空转染组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与其余两组相比,抑制组的细胞增殖、克隆形成数、S期细胞比例及细胞周期蛋白水平均降低,而G0/G1期细胞比例升高,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。抑制组裸鼠的瘤体积小于空转染组和对照组(P<0.05)。结论 通过shRNA抑制Eag1基因表达可抑制MG-63细胞的增殖并诱导G0/G1期阻滞,可能与调控cyclin D1/E通路有关,有望成为骨肉瘤治疗和诊断的新靶点。

关 键 词:Eag1钾通道  骨肉瘤  细胞增殖  细胞周期  细胞周期蛋白
收稿时间:2016-05-31
修稿时间:2016-09-03

Effects of shRNA mediated Eag1 potassium channel silencing on cell proliferation,cell cycle and expression of cyclin D1/E in osteosarcoma cells
CHEN Zhida,DAI Lilin,WU Cairong,ZENG Wenrong,XIONG Yuanfei,WU Jin.Effects of shRNA mediated Eag1 potassium channel silencing on cell proliferation,cell cycle and expression of cyclin D1/E in osteosarcoma cells[J].Chinese Clinical Oncology,2016,21(10):874-878.
Authors:CHEN Zhida  DAI Lilin  WU Cairong  ZENG Wenrong  XIONG Yuanfei  WU Jin
Institution:Department of Orthopaedics,Affiliated Southeast Hospital of Xiamen University,Zhangzhou 363000,China
Abstract:
Keywords:Eag1 potassium channel  Osteosarcoma  Cell proliferation  Cell cycle  Cyclin
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