| 慢病毒介导TCF7L2基因RNAi对胰岛βTC6细胞GPR40表达的影响 |
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| 引用本文： | 毕健琨,任伟,郑晓雅,许丹.慢病毒介导TCF7L2基因RNAi对胰岛βTC6细胞GPR40表达的影响[J].广东医学,2012,33(4):449-452. |
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| 作者姓名： | 毕健琨 任伟 郑晓雅 许丹 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院内分泌科,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 重庆市卫生局医学科研计划项目,重庆医科大学附属第一医院院内医学科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 研究慢病毒介导RNA干扰(RNAi)致TCF7L2基因沉默对胰岛β细胞GPR40表达的影响.方法 构建小鼠TCF7L2基因RNAi慢病毒载体,感染小鼠胰岛βTC6细胞株,进行Real time-PCR及Western blot鉴定干扰效率;检测对照组与干扰组葡萄糖刺激后胰岛素分泌(GSIS)情况;Real time-PCR及Western blot检测TCF7L2稳定下调的小鼠胰岛βTC6细胞中GPR40 mRNA以及蛋白水平.结果 成功构建小鼠TCF7L2基因RNAi慢病毒载体,Real time-PCR及Western blot证实小鼠胰岛βTC6细胞中TCF7L2 mRNA以及蛋白水平显著下调,TCF7L2的mRNA表达量较空白组与对照组分别下降72%以及78%(P<0.05);干扰组中葡萄糖刺激的胰岛素分泌较对照组下降29.4%(P<0.05);TCF7L2基因稳定下调后,Real time-PCR及Western blot发现小鼠胰岛βTC6细胞中GPR40 mRNA以及蛋白水平明显下调,GPR40的mRNA表达量较空白组与对照组分别下降78%以及88%(P<0.05).结论 慢病毒介导的TCF7L2基因RNAi能实现TCF7L2基因的沉默,从而使GPR40表达下调.
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| 关 键 词： | RNA干扰 慢病毒 TCF7L2 GPR40 |
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